UHPLC-MS/MS测定小鼠血浆及肝脏中雷公藤甲素的含量及其毒代动力学研究

作     者：李国庆 舒婷 柴媛媛 黄鑫 江振洲 张陆勇 LI Guo-qing;SHU Ting;CHAI Yuan-yuan;HUANG Xin;JIANG Zhen-zhou;ZHANG lu-yong

作者机构：广东药科大学新药研发中心广东广州510006 中国药科大学新药筛选中心/江苏省药效研究与评价服务中心江苏南京210009 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2022年第47卷第15期

页      面：4183-4189页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81973562 81773995)。 

主　　题：雷公藤甲素 肝毒性 毒代动力学 

摘      要：建立血浆及肝脏中雷公藤甲素(triptolide,TP)含量测定的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)方法,探究雷公藤甲素在C57BL/6小鼠体内的毒代动力学特征及体内雷公藤甲素暴露量与肝损伤之间的关系,以期为后续雷公藤甲素毒性机制研究提供参考。液相色谱分离采用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,3.5μm),流动相为甲醇-0.05 mmol·L^(-1)醋酸铵,梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾(ESI)离子源,多反应监测(MRM)模式。C57BL/6小鼠灌胃给予雷公藤甲素(毒性剂量600μg·kg^(-1))后,于不同时间点采集血液及肝组织,进行雷公藤甲素的含量测定,并检测血生化指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)]。结果显示雷公藤甲素在小鼠体内的毒代动力学参数达峰时间(T_(max))为5 min,峰浓度(C_(max))为14.38 ng·mL^(-1),半衰期(t_(1/2))为0.76 h,曲线下面积(AUC_(0-t))为5.63 h·ng·mL^(-1),平均驻留时间(MRT_(0-t))为0.56 h,清除率(CL_(Z/F))为103.19 L·h^(-1)·kg^(-1)。雷公藤甲素在小鼠肝组织中的分布趋势与血药浓度变化趋势一致,5 min雷公藤甲素浓度达到峰值,继而下降直至代谢完全。雷公藤甲素给药后3 h内血生化指标ALT、AST、ALP、TBA均无显著性变化。雷公藤甲素在小鼠体内清除率大,驻留时间短,且血生化指标没有显著升高,提示雷公藤甲素在体内的游离暴露量不能直接引起肝损伤,可能是通过结合某些物质发挥作用或是激发体内的炎症及免疫反应引起。