基于小胶质细胞-BDNF-神经元信号探讨电针对SNI大鼠的镇痛作用及机制

作     者：杨典平 张英 林培敏 毛安琼 刘庆 YANG Dian-ping;ZHANG Ying;LIN Pei-min;MAO An-qiong;LIU Qing

作者机构：西南医科大学中西医结合学院四川泸州646000 西南医科大学附属中医院麻醉科四川泸州646000 

出 版 物：《中国针灸》 (Chinese Acupuncture & Moxibustion)

年 卷 期：2022年第42卷第9期

页      面：1029-1036,1040页

核心收录：

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

基　　金：四川省科技计划项目:2021YJ0181 

主　　题：坐骨神经选择性损伤 神经病理性疼痛 电针 小胶质细胞 星形胶质细胞 脑源性神经营养因子(BDNF) 神经元 

摘      要：目的:观察电针“环跳“委中对坐骨神经选择性神经损伤(SNI)大鼠脊髓背角胶质细胞活化、脑源性神经营养因子(BDNF)表达、神经元兴奋性及树突棘数量的影响,探讨电针对SNI的镇痛效应机制。方法:第一部分:60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和假电针组,每组15只。除假手术组外,其余组均制备SNI大鼠模型;假手术组仅做切开处理,不损伤神经。电针组于患侧“环跳“委中行电针干预,连续波,频率2 Hz,电流强度1 m A,每次30 min,每日1次,共14 d。假电针组于患侧“环跳“委中旁开0.5 cm处行电针干预,操作、电针参数及疗程同电针组。于造模前1 d,造模后3、7、14 d检测各组大鼠热缩足反射潜伏期和机械缩足反射阈值。造模后14 d,采用Western blot法检测各组大鼠脊髓背角离子钙接头蛋白1(Iba-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、BDNF、即刻早期基因(c-Fos)蛋白表达;采用免疫荧光法检测各组大鼠脊髓背角Iba-1、c-Fos蛋白表达;采用免疫组化法检测各组大鼠脊髓背角GFAP蛋白表达;采用高尔基染色法检测各组大鼠脊髓背角神经元树突棘数量。第二部分:30只SD大鼠随机分为对照组、BDNF组、BDNF+anti-Trk B组,每组10只。对照组予10μL 0.9%氯化钠溶液和二甲基亚砜(DMSO)的1︰1混合液鞘内注射,BDNF组将10μg大鼠重组BDNF溶于10μL0.9%氯化钠溶液和DMSO的1︰1混合液鞘内注射,BDNF+anti-Trk B组将10μg大鼠重组BDNF和30μg酪氨酸激酶受体B(Trk B)抗体溶于10μL0.9%氯化钠溶液和DMSO的1︰1混合液鞘内注射。于鞘内注射前1 d,注射1、3、7 d后检测各组大鼠机械缩足反射阈值。注射7 d后,采用Western blot法和免疫荧光法检测各组大鼠脊髓背角c-Fos蛋白表达。结果:第一部分:造模后3、7、14 d,与假手术组比较,模型组大鼠热缩足反射潜伏期和机械缩足反射阈值降低(P0.05);造模后7、14 d,与模型组比较,电针组大鼠热缩足反射潜伏期和机械缩足反射阈值增加(P0.05)。模型组大鼠脊髓背角Iba-1、GFAP、BDNF、c-Fos蛋白表达及神经元树突棘数量较假手术组增加(P0.05);电针组大鼠脊髓背角Iba-1、BDNF、c-Fos蛋白表达及神经元树突棘数量较模型组降低(P0.05)。第二部分:鞘内注射3、7d后,BDNF组大鼠机械缩足反射阈值较对照组降低(P0.05);BDNF+anti-Trk B组大鼠机械缩足反射阈值较BDNF组增加(P0.05)。BDNF组大鼠脊髓背角c-Fos蛋白表达较对照组增加(P0.05);BDNF+anti-Trk B组大鼠脊髓背角c-Fos蛋白表达较BDNF组降低(P0.05)。结论:电针“环跳“委中对SNI大鼠产生镇痛作用,其机制可能是抑制脊髓背角小胶质细胞活化,从而阻断小胶质细胞-BDNF-神经元信号,最终降低神经元的兴奋性。