不同方法提取血培养瓶培养的抗凝血中布鲁氏菌核酸的比较

作     者：杨晓雯 刘佳音 张宇 范玉 田国忠 赵鸿雁 朴东日 姜海 Yang Xiaowen;Liu Jiayin;Zhang Yu;Fan Yu;Tian Guozhong;Zhao Hongyan;Piao Dongri;Jiang Hai

作者机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 包头医学院公共卫生学院内蒙古包头014040 

出 版 物：《疾病监测》 (Disease Surveillance)

年 卷 期：2022年第37卷第7期

页      面：964-966页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.81902105) 传染病预防控制国家重点实验室青年科学基金(No.2021SKLID508) 布鲁氏菌免疫富集及多重PCR检测技术(No.KFYJ-2021053) 侯云德院士科研青年基金(No.2019HYDQNJJ08) 

主　　题：布鲁氏菌 核酸提取 血培养 

摘      要：目的比较不同提取方法对血培养瓶培养的抗凝血中布鲁氏菌检出率的影响。方法将定量检测的灭活菌液/基因组DNA梯度添加至含抗凝血的血培养瓶中,选择不同的方法提取核酸,利用荧光定量检测其含量。结果磁珠法和裂解法最低能检测添加10~2 CFU/mL的灭活菌液以及10-3 ng/μL的基因组DNA;离心柱法无法检测未经红细胞裂解液处理的添加10~6 CFU/mL的灭活菌液以及10 ng/μL的基因组DNA,经红细胞裂解液处理后也只能检测到添加10~4 CFU/mL的灭活菌液以及1 ng/μL的基因组DNA的模拟样品。结论红细胞裂解液处理模拟样品能够增加核酸的提取量,裂解法提取效果最好,其次是磁珠法,再次是离心柱法。本研究为疑似布鲁氏菌病样品血培养物的核酸检测提供了方法参考,为提高布鲁氏菌病的诊断率提供了新的思路。