海菜花ISSR-PCR反应体系的优化与引物筛选

作     者：杨栋林 罗慧蓉 陈治秀 廖文雪 方轶男 潘巍 侯丛林 吴荻 尚常花 Yang Donglin;Luo Huirong;Chen Zhixiu;Liao Wenxue;Fang Yinan;Pan Wei;Hou Conglin;Wu Di;Shang Changhua

作者机构：广西师范大学珍稀濒危动植物生态与环境保护教育部重点实验室桂林541004 广西师范大学生命科学学院桂林541004 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2022年第20卷第13期

页      面：4416-4424页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：广西高校科学技术研究项目(YB2014056) 广西自然科学基金面上项目(2018GXNSFAA138008)共同资助 

主　　题：海菜花 正交试验 单因素 ISSR-PCR 引物筛选 

摘      要：为建立海菜花ISSR-PCR最优反应体系并筛选出适宜的ISSR-PCR引物,本研究应用L_(16)(3^(4))正交设计试验和单因素实验,筛选ISSR-PCR反应体系中主要参数(引物,2×Taq Master Mix,模板DNA)的最适浓度。结果表明,海菜花最适ISSR-PCR反应体系为引物0.22 ng,2×Taq Master Mix 1.5 U/25μL、模板DNA24 ng。通过最优反应体系进行引物筛选,获得19条适宜海菜花扩增的ISSR引物,并利用10个地理居群的海菜花DNA对该体系进行验证。本研究对海菜花后续的遗传多样性、遗传图谱构建提供参考。