双淬灭TaqMan探针应用于新型冠状病毒核酸检测的初步研究

作     者：伍嘉豪 张嫦丽 王娴默 范文 易华伟 WU Jiahao;ZHANG Changli;WANG Xianmo;FAN Wen;YI Huawei

作者机构：长江大学附属第一医院荆州434021 长江大学医学部荆州434023 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2022年第38卷第4期

页      面：784-790页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：湖北省自然科学基金(项目号:2021CFB261) 题目:磷酸化通过调控多聚泛素链的结构抑制泛素⁃蛋白酶体系统功能的机制研究 

主　　题：新型冠状病毒 核酸检测 荧光定量PCR 双淬灭TaqMan探针 

摘      要：核酸检测是新型冠状病毒肺炎(COVID⁃19)诊断的金标准。目前,临床上主要采用基于TaqMan探针的荧光定量PCR(qPCR)来检测新型冠状病毒(SARS⁃CoV⁃2)的N基因和ORF1a/b序列。在实际的核酸检测中,因采样和qPCR灵敏度问题导致的假阴性结果时有发生。为了优化SARS⁃CoV⁃2的核酸检测,我们设计了含有两个淬灭基团的双淬灭TaqMan探针,与单淬灭TaqMan探针相比,双淬灭TaqMan探针的背景荧光信号更低(161±9 vs.290±18)。同时,我们以N基因质粒和假病毒作为核酸检测的模板,发现双淬灭TaqMan探针检测体系具有更好的检测精密度(CV 1.4%vs 2.3%;0.6%vs 2.1%)以及更低的检测下限。