基于秸秆厌氧干发酵的FISH预处理条件优化
Optimization of Sample Pretreatment for Qualification of the Microbes in Solid State Anaerobic Digestion of Corn Stover by Fluorescence in situ Hybridization作者机构:山东理工大学农业工程与食品科学学院山东淄博255049
出 版 物:《环境科学与技术》 (Environmental Science & Technology)
年 卷 期:2014年第37卷第3期
页 面:117-121页
学科分类:07[理学] 09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 0713[理学-生态学]
基 金:国家自然科学基金(51008185) 山东省中青年科学家科研奖励基金(BS2011NJ015) 山东理工大学青年支持计划(110011)
摘 要:优化了荧光原位杂交技术(FISH)定量测定秸秆厌氧干发酵基质中微生物的样品预处理条件,并在最优条件下做了验证性实验。结果表明:使用无水乙醇作为清洗液,FISH样品的荧光信号强度和丰度比用PBS清洗液(磷酸缓冲盐溶液)时有显著提高;样品预处理过程中加无菌玻璃珠震荡能提高微生物的分散度,从而提高FISH技术对秸秆厌氧发酵基质中微生物定量的准确性;采用离心转速为13 000 r/min时,微生物菌体收集率提高,而且还能保证完好的细胞形态,为后续的FISH杂交奠定基础。