miR-30c靶向Wnt/β-catenin信号对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖、凋亡的影响

作     者：曹嵘 郭龙 解传奇 李媛 Cao Rong;Guo Long;Xie Chuanqi;Li Yuan

作者机构：河南省商丘市第一人民医院眼科商丘476100 

出 版 物：《中华内分泌外科杂志》 (Chinese Journal of Endocrine Surgery)

年 卷 期：2022年第16卷第3期

页      面：274-278页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河南省医学科技攻关计划项目(2018020945) 

主　　题：miR-30c 糖尿病 人视网膜血管内皮细胞 细胞凋亡 

摘      要：目的探讨miR-30c靶向Wnt/β-catenin信号对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(human retinal endothelial cells,HRECs)增殖、凋亡的影响。方法培养HRECs细胞,分别给予正常浓度(对照组)和高浓度葡萄糖(高糖组)。分别转染miR-30c模拟物、阴性对照(miR-NC)、Wnt1过表达载体(pcDNA3.1-Wnt1)和空载体(pcDNA3.1)。RT-PCR法检测各组细胞miR-30c的表达水平。Western blot法检测各组细胞Wnt1、β-catenin和GSK-3β蛋白的表达水平。双荧光素酶实验验证miR-30c对Wnt1的靶向关系。噻唑蓝法检测各组细胞的增殖活性。流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平。结果与对照组比较,高糖组细胞中miR-30c的表达明显降低[(0.94±0.11)vs(0.32±0.06),P0.001],细胞增殖活性显著降低,细胞凋亡率显著增加[(0.75±0.08)vs(0.13±0.04),(3.53±0.29)%vs(14.89±0.94)%,P0.001];与高糖+miR-NC组比较,高糖+miR-30c组细胞增殖活性显著升高,细胞凋亡率降低[(0.14±0.04)vs(0.64±0.06),(14.14±0.86)%vs(6.28±0.45)%,P0.001]。与miR-NC组比较,miR-30c组共转染WT-Wnt1后的荧光素酶活性显著降低[(0.97±0.09)vs(0.26±0.03),P0.001]。与对照组比较,高糖组细胞Wnt1、β-catenin和GSK-3β蛋白表达均显著升高[(0.43±0.05)vs(1.02±0.09),(0.25±0.04)vs(0.82±0.10),(0.39±0.04)vs(0.76±0.11),P0.001];与高糖+miR-NC组比较,高糖+miR-30c组细胞Wnt1、β-catenin和GSK-3β蛋白表达均显著降低[(1.04±0.10)vs(0.68±0.06),(0.79±0.09)vs(0.34±0.05),(0.74±0.12)vs(0.48±0.06),P0.001]。与高糖+miR-30c组比较,高糖+miR-30c+pcDNA3.1-Wnt1组细胞增殖活性显著降低,细胞凋亡率明显升高[(0.66±0.07)vs(0.31±0.05),(4.26±0.57)%vs(9.75±0.85)%,P0.001]。结论miR-30c可能通过负调控Wnt/β-catenin信号通路,促进细胞增殖,抑制高糖引起的HRECs细胞凋亡。