E型牛肠道病毒新疆BL311株的分离鉴定及致病性分析

作     者：陈俊贞 李祯 张成远 袁圆圆 张乐乐 付强 史慧君 

作者机构：新疆农业大学动物医学学院 中宁县动物疾病预防控制中心 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2022年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：自治区国际合作项目(2020E01006) 自治区天山创新团队项目(2020D14005) 自治区自然科学基金项目(2021D01A77) 自治区百名博士引进计划项目 自治区研究生科研创新项目(XJ2022G 131) 新疆农业大学大学生创新项目(dxscx2021119) 

摘      要：以采集自新疆博乐某牛场腹泻牛的粪便，接种胎牛肾细胞（MDBK），盲传15代分离牛肠道病毒（BEV），使用蚀斑纯化法连续纯化5轮得到纯化病毒，并命名为BL311。使用BL311株感染MDBK细胞后，观察细胞病变效应（CPE），采用Reed-Muench法计算病毒滴度，利用理化性质检测、透射电镜观察、基因型分析及对小鼠的致病性试验鉴定BL311分离株。结果显示，BL311分离株感染MDBK细胞24 h后细胞出现变圆、破裂和脱落等致细胞病变效应，病毒滴度显著增高（P0.05）；36 h后细胞出现大量CPE，病毒滴度极显著增高（P0.01）。理化性质鉴定结果显示BL311分离株对有机溶剂具有一定抵抗力，紫外光照射1 h或56℃环境培养1 h可使毒株失活。电镜下观察BL311毒株为直径25～30 nm的球形颗粒，具有典型的小RNA病毒粒子形态。基因测序结果显示BL311毒株的基因全长是7514 nt，与国内报道的HY12分离株（KF748290）的同源性高达99%，属于BEV-E3型。致病性实验结果显示，BALB/c小鼠感染BL311毒株后，器官表现为肿大，且伴有出血；病理组织学观察可见组织器官炎性细胞浸润及出血。本研究分离纯化得到一株具有较强致病性的E种肠道病毒，将为新疆BEV的流行病学调查及致病机制研究提供依据。