柚皮素通过p53-MDM2信号通路对人骨肉瘤SJSA-1细胞增殖及周期的影响

作     者：胡文姝 李伟 HU Wenshu;LI Wei

作者机构：南京中医药大学江苏南京210023 

出 版 物：《辽宁中医杂志》 (Liaoning Journal of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2022年第49卷第6期

页      面：23-27,223页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金(81573304) 

主　　题：柚皮素 人骨肉瘤细胞 p53 MDM2 

摘      要：目的采用网络药理学、分子对接及生物分子实验共同探讨柚皮素抑制人骨肉瘤(OS)细胞SJSA-1细胞增殖及周期的机制作用。方法通过CCK-8法确定柚皮素对SJSA-1细胞增殖的抑制作用,检索TCMSP和SwissTargetPredictation数据库获得柚皮素潜在靶点;通过GeneCards、OMIM和TTD数据库筛选骨肉瘤靶点,将柚皮素与OS作用的交集潜在靶点导入STRING绘制PPI网络。对交集靶蛋白进行GO功能富集分析和KEGG通路分析;对鼠双微体基因2(murine double minute 2,MDM2)靶点使用Schr9dinger软件进行分子对接。用Western blot法测定p53、MDM2及p21蛋白表达,并用流式细胞法分析细胞周期变化。结果共筛选出102个柚皮素潜在靶点与260个骨肉瘤靶点,GO富集分析和KEGG对12个交集潜在靶点进行更深入分析。对接结果显示柚皮素能够较好地和MDM2结合并与MDM2蛋白分子氨基酸残基产生多种作用力。生物实验结果显示柚皮素在SJSA-1细胞中IC为18.3μmol/L并诱使细胞周期G2期发生阻滞。结论基于网络药理学、分子对接及细胞生物实验,表明柚皮素通过p53-MDM2信号通路抑制人骨肉瘤细胞SJSA-1增殖和诱导细胞G2期阻滞。