利用α-溶血素系统分泌表达重组人白介素-6

作     者：宁亚蕾 周立雄 张卫军 鲁东水 肖斌 毛旭虎 邹全明 NING Ya-lei;ZHOU Li-xiong;ZHANG Wei-jun;LU Dong-shui;XIAO Bin;MAO Xu-hu;ZHOU Quan-ming

作者机构：第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038 重庆工学院生物工程学院生物制药系重庆400050 

出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期：2008年第24卷第4期

页      面：380-384页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：重庆自然科学基金重点项目(2006BA5024) 

主　　题：人白介素6 α-溶血素分泌系统 hly操纵子 胞外分泌表达 

摘      要：目的构建基于大肠杆菌α-溶血素(HlyA)分泌机制的原核胞外分泌表达载体系统,将重组人白介素6(rhIL-6)分泌至胞外培养基中。方法利用分子克隆手段,从引起人泌尿道感染的大肠杆菌UPECJ96菌株染色体上获得了α-溶血素(HlyA)系统的分泌功能基因,与外源基因片段hIL-6一起克隆至pQE30骨架载体,构建了胞外分泌表达质粒pISQ,转化***10,诱导表达后通过Western blot检测培养上清中hIL-6的表达。结果获得了与设计完全一致的pISU载体,Western blot结果显示,可以在pISQ/*** Top10培养液上清中检测到与His-hIL6-HlyAs融合蛋白相对分子质量大小一致的特异条带。结论大肠杆菌HlyA分泌系统操纵子能够在染色体和质粒间传递,rhIL-6能够通过该系统被特异地分泌至胞外培养基中,以可溶形式存在,为后续生物学研究奠定了基础。