BTB-CNC异体同源体1抑制尿道上皮细胞中转化生长因子-β信号通路的激活从而阻断微小RNA-155-5p诱导的炎性反应
BTB and CNC homology1 blocks microRNA-155-5p-induced inflammatory response by inhibiting transforming growth factor-βsignaling pathway in urothelial cells作者机构:河北医科大学第二医院泌尿外科石家庄050000
出 版 物:《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)
年 卷 期:2022年第39卷第6期
页 面:1058-1061页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含:普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学]
主 题:微小RNA-155-5p 尿道狭窄 炎性因子
摘 要:目的观察尿道上皮细胞中BTB-CNC异体同源体1(BACH1)对转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的影响, 从而参与微小RNA(miR)-155-5p诱导的炎症和纤维化的调节。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测BACH1敲低或过表达后SV-HUC-1细胞中的TGF-β信号通路TGF-β、信号转导分子7(Smad7)和信号转导分子3(Smad3)的信使RNA(mRNA)和蛋白水平。我们在转染了miR-155-5p的细胞中过表达了BACH1, 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin, IL)-1β和IL-6水平, RT-qPCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的表达水平。采用单因素方差分析比较两组间差异。结果 TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.14±0.11比0.99±0.07, F=238.581;1.78±0.06比0.96±0.08, F=201.720, P0.01), 和蛋白表达水平(1.36±0.08比1.0±0.08, F=32.911;1.34±0.04比1.01±0.08, F=39.361, P0.05)在BACH1敲低后升高, 在BACH1过表达后下降(mRNA水平分别为0.39±0.06比1.09±0.04, F=246.369;0.56±0.09比1.04±0.11, F=36.668;蛋白水平分别为0.31±0.12比1.00±0.07, F=81.323;0.63±0.05比0.98±0.14, F=16.026, P0.01), 而Smad7的mRNA水平(0.50±0.07比1.01±0.06, F=105.446)和蛋白水平(0.40±0.08比1.00±0.11, F=58.835)被BACH1小干扰RNA(siRNA)下调, P0.01, 在BACH1过表达后上调(mRNA水平为1.67±0.11比1.05±0.09, F=55.960;蛋白水平为1.80±0.16比0.99±0.10, F=52.571, P0.01)。由miR-155-5p mimics引起的IL-1β、IL-6和TNF-α水平的增加因BACH1过表达而减弱(497.60±16.85比287.83±14.89比310.30±13.77, F=171.691;795.17±34.84比396.53±24.59比425.67±21.39, F=195.307;764.43±27.05比401.67±23.06比454.9±24.76, F=184.088, P0.01)。由miR-155-5p mimics诱导的VEGF、FN和Collagen Ⅳ的上调也被BACH1过表达阻断(1.90±0.10比0.95±0.05比1.21±0.05, F=111.524;2.03±0.11比0.98±0.09比1.11±0.07, F=121.346;1.91±0.11比1.11±0.06比0.94±0.04, F=151.621, P0.01)。TGF-β/smad信号通路相关因子TGF-β、Smad3和Smad7被过表达miR-155-5p激活, 但BACH1共表达后, TGF-β/smad信号通路活性受到抑制(2.18±0.06比0.97±0.06比0.92±0.11, F=240.091;1.64±0.11比1.01±0.08比0.92±0.03, F=67.813;0.41±0.06比1.00±0.06比0.89±0.08, F=65.57, P0.01)。结论 BACH1抑制尿道上皮细胞中TGF-β信号通路的激活从而阻断miR-155-5p诱导的炎性反应。