免疫亲和法敲除三七总皂苷中三七皂苷R1的实验研究

作     者：邵晓 胡超 林子璇 邵建国 赵玉男 SHAO Xiao;HU Chao;LIN Zixuan;SHAO Jianguo;ZHAO Yunan

作者机构：南京中医药大学南通附属医院江苏南通226001 南京中医药大学医学院·整合医学学院江苏南京210023 南京中医药大学江苏南京210023 河南中医药大学第一附属医学院河南郑州450000 南通大学附属南通第三医院江苏南通226001 

出 版 物：《中华中医药学刊》 (Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2022年第40卷第6期

页      面：70-73,I0029-I0030页

学科分类：100703[医学-生药学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81873025) 江苏省卫生厅基金(H2017057) 江苏省研究生科研与实践创新计划(KYCX18-1567) 

主　　题：三七 三七皂苷R1 免疫亲和法 制备液相 UPLC-CAD 

摘      要：目的基于目标成分敲除技术,尝试免疫亲和法敲除三七总皂苷中的三七皂苷R1(notoginsenoside R1),并与制备液相法进行比较。方法首先,运用制备液相色谱系统,基于目标成分三七皂苷R1制定洗脱程序,回收敲除三七皂苷R1后的三七皂苷样品;其次,制备三七皂苷R1-白蛋白半抗原抗体,并采用该抗体制备免疫亲和柱,利用目标成分特异亲和吸附原理敲除三七总皂苷中的三七皂苷R1,并回收敲除掉目标成分后的样品;最后,采用超高效液相色谱-电喷雾检测器(UPLC-CAD)柱后补偿结合内参法,对敲除目标成分后的三七皂苷样品进行成分分析。结果UPLC-CAD成分分析显示,三七总皂苷中原人参二醇型皂苷(PPDs)和原人参三醇型皂苷(PPTs)含量的比值为0.67,Rb1/Rg1的值为0.55。制备液相法能够从三七总皂苷中彻底敲除三七皂苷R1,敲除后PPDs和PPTs含量的比值为0.70,Rb1/Rg1的值为1.82。免疫亲和法可以敲除大部分三七皂苷R1,敲除后PPDs和PPTs含量的比值为0.53,Rb1/Rg1的值为0.33。结论两种敲除方法均可以将三七皂苷R1从三七总皂苷内敲除,但同时也会改变总皂苷中各单体皂苷成分含量的比值。对于总皂苷中Rb1/Rg1的值,免疫亲和法影响小于制备液相法。