鸡胚细胞培养狂犬病病毒工艺的优化

作     者：郭采平 王春华 周兰贞 刘永娣 罗姗 张剑平 周维 GUO Cai-ping;WANG Chun-hua;ZHOU Lan-zhen;LIU Yong-di;LUO Shan;ZHANG Jian-ping;ZHOU Wei

作者机构：深圳市卫光生物制品股份有限公司广东深圳518107 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2015年第28卷第6期

页      面：636-640页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：鸡胚细胞 狂犬病病毒 工艺优化 病毒滴度 

摘      要：目的优化鸡胚细胞（chick embryo cells,CECs）培养狂犬病病毒（rabies virus,RV）的工艺。方法以M199为基础培养基,向其分别加入人血白蛋白、胎牛血清及HEPES缓冲液,并均加入碳酸氢钠,配制培养基M1、M2和M3。将驯化获得的CTNCEC25株按1∶5 000的比例接种于CECs悬液中,在不同培养条件下,通过单因素试验初步确定培养基配方、培养温度、接种MOI及培养时间4大工艺参数范围,再以正交试验确定上述条件的最佳组合。结果单因素试验初步确定的工艺参数：采用M2或M3,培养温度为33~36℃,MOI=0.01~0.001 FFU/细胞,培养时间为72~120 h,可获得较高的病毒滴度（7.0 lg FFU/ml以上）。正交试验确定的最佳工艺条件：采用M3,培养温度为33℃,MOI=0.01 FFU/细胞,培养时间为120 h,该工艺参数获得病毒滴度可达7.5 lg FFU/ml。结论本实验优化了CECs培养RV的工艺,CTNCEC25株的病毒滴度由约6.0 lg FFU/ml提高至7.0 lg FFU/ml以上,为疫苗生产获得理想抗原量奠定了基础。