共聚焦激光扫描显微镜对厚样本光学断层及其三维重建
Optic-sectioning and three-dimensional reconstruction of thick biological tissues by confocal laser scanning microscope作者机构:武汉大学医学院人体解剖与组织胚胎学系医学结构生物学研究中心武汉430071
出 版 物:《解剖学杂志》 (Chinese Journal of Anatomy)
年 卷 期:2005年第28卷第2期
页 面:188-191,i005页
核心收录:
主 题:共聚焦激光扫描显微镜 三维重建 光学断层 样本 扫描步距 分辨率 内弹性膜 光学切片 切片厚度 结构完整 结构模糊 针孔 系统 主动脉 光信号 强度
摘 要:目的:探讨共聚焦系统各参数对厚样本光学断层、三维重建的影响。方法:用共聚焦系统对醛诱导后的大鼠主动脉作光学断层。分析激光强度、探测针孔直径、扫描步距等参数对内弹性膜三维重建的影响。结果和结论:(1)针孔为1Airy单位,调整激光强度以满足离开焦点1/2Z-轴分辨率距离时,焦平面最强荧光信号减弱50%,此条件下获得的光学切片分辨率和信息完整性达最佳平衡,切片厚度可经验地定视为等于系统Z轴分辨率。(2)在上述条件下,扫描步距为Z轴分辨率时,重建结构完整。(3)当扫描步距不变,针孔小于1Airy单位时,重建结构部分缺损;针孔大1Airy单位时,重建结构模糊。(4)样本经透明处理后,断层深度可增大4倍。