雄激素受体辅调节因子BAP18在大鼠睾丸细胞中的表达及其意义

作     者：孙士莹 孙戈 林琳 赵越 SUN Shiying;SUN Ge;LIN Lin;ZHAO Yue

作者机构：中国医科大学生命科学学院教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122 安徽医科大学第二附属医院妇产科安徽合肥230601 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2022年第48卷第3期

页      面：584-590页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：科技部“973”计划项目(2013CB945201) 国家自然科学基金项目(31171259,81801511,32170603,32100440) 

主　　题：BPTF相关蛋白18 雄激素受体 转录调控 睾丸间质细胞 睾酮 双氢睾酮 

摘      要：目的:观察溴区PHD结构域转录因子(BPTF)相关蛋白18(BAP18)在睾丸细胞中的表达及其在雄激素受体(AR)信号通路过程中发挥的作用,阐明BAP18调控AR信号通路的具体靶基因,探讨BAP18在睾丸细胞中发挥的生物学功能。方法:收集大鼠睾丸支持细胞R2C和TM3及睾丸间质细胞TM4和15P-1,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各细胞中BAP18和AR mRNA表达水平,Western blotting法检测细胞中BAP18和AR蛋白表达水平,蛋白免疫共沉淀实验(co-IP)检测在睾丸R2C细胞中BAP18与AR之间的相互作用关系。在R2C细胞中采用带有FLAG标签的BAP18过表达质粒使BAP18过表达(BAP18过表达组)。荧光素酶双基因报告实验检测R2C细胞中荧光素酶活性。对照组采用PcDNA3空载质粒转染R2C细胞,RT-qPCR法检测BAP18过表达前后睾酮(T)和双氢睾酮(DHT)作用后R2C细胞中BAP18、AR、STAR、HSD3B1、CYP17A1和DDX25 mRNA水平,Western blotting法检测BAP18过表达前后T和DHT作用后R2C细胞中CYP17A1蛋白表达水平。结果:在睾丸间质细胞和支持细胞中均有BAP18表达,但AR主要在睾丸间质细胞中表达;在睾丸R2C细胞中BAP18与AR存在相互作用,且上调AR介导的基因转录。与对照组比较,在T和DHT作用下BAP18过表达组R2C细胞中CYP17A1 mRNA和蛋白表达水平升高(P0.05),而CYP17A1 mRNA表达水平高于过表达前(P0.05)。结论:BAP18可以在睾丸间质细胞中与AR相互作用并调控AR信号通路重要靶基因CYP17A1,可能参与睾丸间质细胞的生理过程。