构建多功能外泌体用于治疗未分化甲状腺癌

作     者：张瑞国 王聪聪 李宁 侯莎莎 张文新 张如意 申一鸣 孟召伟 贾强 谭建 Zhang Ruiguo;Wang Congcong;Li Ning;Hou Shasha;Zhang Wenxin;Zhang Ruyi;Shen Yiming;Meng Zhaowei;Jia Qiang;Tan Jian

作者机构：天津医科大学总医院核医学科300052 青岛大学附属医院核医学科266000 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2022年第39卷第5期

页      面：858-861页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81801732) 

主　　题：外泌体 碘放射性同位素 同位素标记 未分化甲状腺癌 

摘      要：目的观察131I标记、内化精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(iRGD)靶向的多功能外泌体(iRGD-Exo-131I)对未分化甲状腺癌(ATC)细胞的杀伤作用。方法蛋白印迹检测Hth7、Cal-62(购自上海生命科学院细胞所)两种ATC细胞中整合素αvβ3的表达;设计包含酪氨酸、iRGD肽段及外泌体膜蛋白(Lamp2b)基因的质粒,将其转染HEK-293T(天津医科大学肿瘤医院)细胞后利用超高速离心法得到靶向外泌体(iRGD-Exo);共聚焦显微镜观察Hth7细胞对靶向及无靶向外泌体的摄取情况;氯胺T法制备iRGD-Exo-131I;细胞毒性实验验证iRGD-Exo的细胞安全性,并比较131I标记的靶向及无靶向外泌体对Hth7细胞的毒性;构建Hth 7荷瘤鼠模型,当瘤体直径约8 mm时按随机数字表法分为4组(每组5只),分别尾静脉注射磷酸盐缓冲液、无靶向外泌体(blank-Exos)、blank-Exos-131I或iRGD-Exos-131I溶液,在注射后不同时间点(0、3、6、9、12、15、18 d)记录瘤体体积及荷瘤鼠体重。采用两样本t检验、单因素方差分析统计数据。结果整合素αvβ3在Hth7、Cal-62细胞中明显高表达。共聚焦实验显示外泌体经iRGD修饰后可增强Hth7细胞对其的摄取能力。iRGD-Exo-131I的标记率为(50.16±4.21)%,放化纯95%。共孵育48 h后,131I标记的靶向与无靶向外泌体组Hth7细胞存活率均显著低于游离Na131I组[靶向组:(40.97±6.55)%比(83.80±5.21)%,t=12.531,P0.05;无靶向组:(67.32±8.92)%比(83.80±5.21)%,t=3.912,P0.05];且无靶向组高于靶向组[(67.32±8.92)%比(40.97±6.55)%,t=5.833,P0.05];动物实验亦证实iRGD-Exo-131I能更有效地抑制ATC细胞的增殖。结论成功制备iRGD-Exo-131I,且该标志物较稳定,靶向性良好;体外及体内实验证实其能有效杀伤ATC细胞。