神经酰胺合成酶3通过SMAD6基因影响肝细胞癌的侵袭和转移

作     者：蔡进中 刘育齐 李启洋 文振超 李勇 陈现现 CAI Jinzhong;LIU Yuqi;LI Qiyang;WEN Zhenchao;LI Yong;CHEN Xianxian

作者机构：深圳市人民医院介入科深圳518020 

出 版 物：《中南大学学报（医学版）》 (Journal of Central South University ：Medical Science)

年 卷 期：2022年第47卷第5期

页      面：588-599页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：深圳市医学科研基金(B2019045)。 

主　　题：神经酰胺合成酶3 母体抗生物皮肤生长因子同源物6 肝细胞癌 侵袭 转移 

摘      要：目的:由于缺乏早期诊断和有效治疗,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后较差。因此迫切需要更好地了解HCC相关的分子机制,并确定早期诊断和治疗的有效靶点。本研究旨在探讨神经酰胺合成酶3(ceramide synthase 3,CerS3)在HCC中的表达及其生物学作用。方法:收集深圳市人民医院159例HCC接受根治性切除术患者的临床标本,包括HCC组织和邻近非肿瘤组织。采用免疫组织化学染色、蛋白印迹法和real-time PCR检测CerS3在HCC组织和邻近非肿瘤组织中的表达。体外实验中,将Hep3B细胞分为载体对照组和CerS3载体组,并分别用含有cDNA对照或CerS3 cDNA的反转录病毒载体转染细胞;将HCC LM3细胞分为shRNA对照组或CerS3 shRNA组,并分别用含有shRNA对照或CerS3 shRNA慢病毒载体转染细胞。分别采用MTT、EdU、Transwell和划痕试验测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并进行RNA测序以确定CerS3的下游信号。结果:与相应的相邻非肿瘤组织相比,HCC组织中CerS3 mRNA和蛋白质水平均升高(均P0.05)。Cox回归生存模型的单变量和多变量分析显示:静脉浸润(95%CI:1.8~9.2,P0.01)、TNM分期(95%CI:2.3~5.2,P0.05)、组织学分级差(95%CI:1.4~6.8,P0.05)和CerS3(95%CI:1.5~3.9,P0.05)与HCC患者总生存率显著相关。此外,与肿瘤组织中CerS3低表达患者相比,CerS3高表达患者的总生存率显著缩短(P0.05)。与载体对照组相比,CerS3载体组Hep3B细胞活力、EdU阳性细胞数、迁移和侵袭细胞数均显著增加(均P0.05)。与shRNA对照组相比,CerS3 shRNA组HCC LM3细胞活力、EdU阳性细胞数、迁移和侵袭细胞数均显著降低(均P0.05)。RNA测序将母体抗生物皮肤生长因子同源物6(small mothers against decapentaplegic family member 6,SMAD6)基因鉴定为促进HCC转移的致癌基因。结论:CerS3的过度表达与不良临床特征和不良预后密切相关。CerS3在功能上可通过激活SMAD6基因参与肝癌细胞的增殖、侵袭和转移。