人PD-1分子基因克隆及其在COS-7细胞中表达的研究

作     者：张华欣 白云 姜曼 黎万玲 ZHANG Hua-xin, BAI Yun, JIANG Man, et al . (Department of Molercular Biology, Third Military Medical University, 400038,China)

作者机构：第三军医大学分子遗传教研室重庆400038 

出 版 物：《西北国防医学杂志》 (Medical Journal of National Defending Forces in Northwest China)

年 卷 期：2003年第24卷第4期

页      面：250-252页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 2 712 46) 

主　　题：PD—1 COS—7细胞 基因表达 

摘      要：目的 :克隆人PD - 1分子的编码序列cDNA ,将其重组进真核表达载体中 ,并表达于COS - 7细胞。方法 :从活化的人T细胞cDNA文库中以PCR方法克隆编码人PD - 1的编码cDNA序列 ,将其克隆进真核表达载体pcDNA3.1 (+) ,构建成重组表达载体 ,并测序证实。用脂质体法转染COS - 7细胞 ,流式细胞仪检测PD - 1分子的膜表达。结果 :PCR方法扩增出一 880bp左右的基因片段 ,插入pcDNA3.1 (+)载体后构建成重组表达质粒 ,经测序证实扩增的片段为人PD - 1编码序列。将重组质粒转染COS - 7细胞 ,流式细胞仪检测显示有 2 1 .1 0 %的细胞表达人PD - 1分子。结论 :本研究为进一步研究PD - 1分子在免疫耐受。