补肾活血法对糖皮质激素作用下MC3T3-E1细胞自噬的影响及机制研究

作     者：岳辰 陈俊名 李无阴 张虹 刘又文 YUE Chen;CHEN Jun-ming;LI Wu-yin;ZHANG Hong;LIU You-wen

作者机构：河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)洛阳471000 浙江中医药大学杭州310000 

出 版 物：《中华中医药杂志》 (China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy)

年 卷 期：2022年第37卷第4期

页      面：2327-2330页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.81804126,No.82074472) 河南省科技攻关项目(No.202102310179)。 

主　　题：补肾活血法 MC3T3-E1细胞 自噬 AMPK/mTOR信号通路 

摘      要：目的:研究补肾活血法对糖皮质激素作用下MC3T3-E1细胞自噬的影响及可能机制。方法:将MC3T3-E1细胞分5组进行实验:对照组(A组)、地塞米松组(B组)、地塞米松+200μg/mL补肾活血药组(C组)、地塞米松+400μg/mL补肾活血药组(D组)、地塞米松+400μg/mL补肾活血药+Compound C组(E组)。Western Blot检测各组AMPK/mTOR信号通路中p-AMPK、p-mTOR,自噬相关Beclin-1及LC3Ⅱ/Ⅰ,成骨相关RUNX-2表达水平;细胞免疫荧光观察各组p-AMPK、Beclin-1及LC3表达情况;透射电镜观察各组自噬小体情况;CCK-8检测各组细胞增殖能力。结果:与A组比较,B组细胞自噬水平增强,p-AMPK、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著升高(P0.05),p-mTOR、RUNX-2表达显著降低(P0.05),细胞增殖受到抑制(P0.05)。与B组比较,D组细胞自噬水平进一步增强,p-AMPK、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、RUNX-2进一步升高(P0.05),p-mTOR进一步降低(P0.05),24、36 h时细胞增殖能力显著增强(P0.05),而AMPK抑制剂Compound C可以明显减少补肾活血药对自噬的激活。结论:补肾活血法可通过激活AMPK/mTOR信号通路提高MC3T3-E1细胞自噬水平,从而缓解糖皮质激素对MC3T3-E1细胞增殖及成骨活性的抑制作用。