基质重塑相关7(MXRA7)对SHI-1白血病细胞系生物学功能的影响

作     者：郑宇丹 孙振江 马鲲鹏 王宜强 林丹丹 ZHENG Yu-Dan;SUN Zheng-Jiang;MA Kun-Peng;WANG Yi-Qiang;LIN Dan-Dan

作者机构：江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院苏州大学医学部江苏苏州215000 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2022年第30卷第3期

页      面：688-694页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81600076和81271050)。 

主　　题：MXRA7 急性髓系白血病 细胞凋亡 BCL-2 

摘      要：目的:构建过表达人全长基质重塑相关7(MXRA7)的SHI-1急性髓系白血病稳转细胞系,检测MXRA7对SHI-1细胞生物学功能的影响。方法:合成人MXRA7全长的cDNA序列,并连接到慢病毒穿梭载体pRRL-Venus中,使用293T细胞包装产生慢病毒,感染人白血病细胞系SHI-1,应用流式细胞术分选YFP;细胞,扩大培养获得稳转细胞系。通过Real-time qPCR、Western blot及激光共聚焦技术验证MXRA7在SHI-1细胞中的表达及分布。采用流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期,采用Annexin V和7-AAD染色流式检测细胞凋亡,采用Western blot技术检测与细胞凋亡相关蛋白的表达情况。结果:成功构建了过表达MXRA7的SHI-1稳转细胞系,激光共聚焦证明MXRA7表达于SHI-1细胞的胞浆中;与对照细胞相比,过表达MXRA7不会影响细胞增殖和细胞周期,但会降低甲氨蝶呤诱导的凋亡细胞的百分比,促进凋亡抑制蛋白BCL-2的表达。结论:成功构建了过表达MXRA7的SHI-1稳转细胞系,MXRA7通过促进BCL-2的表达来抑制药物诱导的细胞凋亡。