固定化扁桃酸消旋酶的制备及其性能

作     者：汪千慧 刘梦灵 覃燕梅 张文涛 赵俊杰 顾佳黎 孙来玉 WANG Qianhui;LIU Mengling;TAN Yanmei;ZHANG Wentao;ZHAO Junjie;GU Jiali;SUN Laiyu

作者机构：湖州师范学院生命科学学院浙江湖州313000 

出 版 物：《湖州师范学院学报》 (Journal of Huzhou University)

年 卷 期：2022年第44卷第4期

页      面：40-45页

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：浙江省自然科学基金项目(LQ16B060003) 浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划(2021R431017) 湖州市科技计划公益性应用研究项目(2019GZ04) 

主　　题：扁桃酸消旋酶 固定化 镍离子螯合微球 

摘      要：为克服游离扁桃酸消旋酶的稳定性差、不易回收等缺陷,以镍离子螯合的琼脂糖微球为载体,对扁桃酸消旋酶进行固定化实验.由SDS PAGE电泳显示,镍离子螯合的琼脂糖微球能专一性地从粗酶液中吸附扁桃酸消旋酶.以偶联效率、蛋白结合率、相对活力和活力回收等为指标,考察给酶量的影响,结果显示:当给酶量为12 mg蛋白/g微球时,固定化效果最佳;固定化酶最佳的反应温度为30℃、pH为8.0、底物浓度为80 mM;与游离酶相比,固定化酶对温度和底物的耐受性均有提高;固定化酶操作稳定性好,在循环使用30批次后,残余酶活为首次固定化酶酶活的60%左右.