熊胆粉通过调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路产生对急性酒精性肝损伤小鼠的肝保护作用

作     者：戴晨曦 阿尔斯拉·玉苏甫 孙慧 陈令坤 任永申 邓旭坤 Dai Chenxi;Yusuf Arslan;Sun Hui;Chen Lingkun;Ren Yongshen;Deng Xukun

作者机构：中南民族大学药学院/民族药学国家级实验教学示范中心武汉430074 江西资溪康仁堂生物科技开发有限公司资溪335300 

出 版 物：《世界科学技术-中医药现代化》 (Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology)

年 卷 期：2021年第23卷第11期

页      面：4081-4089页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：江西省委人才办江西省“双千计划”科技创新高端人才(青年)项目(JXSQ2019201105):熊胆产品基础研究与产业升级研究,负责人:任永申 中南民族大学科学发展院中南民族大学2019中央科研业务费(自然科学)(CZD19007):巴东县中医药产业发展调研与精准扶贫,负责人:邓旭坤。 

主　　题：酒精肝损伤 Keap1/Nrf2/ARE 熊胆粉 肝保护 

摘      要：目的观察研究熊胆粉(Pulvis Fellis Ursi,PFU)对急性酒精性肝损伤小鼠的肝保护作用及其可能的机理。方法取昆明种小鼠50只,随机分为正常组、模型组、PFU低、中、高剂量组(剂量分别为150、300、600 mg·kg^(-1),溶于生理盐水),每组10只。正常组和模型组小鼠每天灌胃生理盐水(10 mL·kg^(-1)),PFU组每天灌胃相应剂量溶液,连续8天。末次给药结束后,模型组以灌胃的方法给予50%乙醇溶液(10 mL·kg^(-1)),每12 h一次,共6次,末次给予50%乙醇溶液4 h后,处死小鼠并收集血清及肝脏组织。分别用生化试剂盒检测血清中ALT、AST、TG、TC和肝脏组织中GSH、T-SOD和MDA水平;用酶联免疫法检测肝脏组织TNF-α、IL-1β和IL-6水平;用HE染色法观察肝脏组织显微结构变化情况;用免疫印迹法检测肝组织总Keap1的表达和肝组织核内Nrf2的表达,用免疫印迹和免疫组化法分别检测肝组织总HO-1和GCLC蛋白的表达。结果PFU能显著下调乙醇所致肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TG和TC的异常升高,并改善乙醇诱导的肝脏显微结构变化。与肝损伤模型组比较,PFU组小鼠肝组织内MDA水平明显降低,GSH和T-SOD水平则明显增加。进一步研究表明,乙醇能诱导小鼠肝脏内炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的上调,PFU可以剂量依赖性地缓解了上述病变。并且PFU预处理组下调了Nrf2的抑制因子Keap1的表达,从而促进了Nrf2蛋白的入核并上调了乙醇抑制的下游蛋白HO-1和GCLC的表达,从而发挥肝保护的作用。结论熊胆粉对小鼠急性酒精性肝损伤有一定的预保护作用,其机制可能与调控肝脏内Keap1/Nrf2/ARE信号通路,恢复并上调由乙醇所破坏的肝脏氧化平衡有关。