氯氰碘柳胺钠通过抑制蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2诱导RAS突变型肺癌细胞衰老和死亡

作     者：席芮颖 付乃洁 李润择 张国林 王飞 XI Ruiying;FU Naijie;LI Runze;ZHANG Guolin;WANG Fei

作者机构：中国科学院成都生物研究所成都610041 中国科学院大学北京100049 

出 版 物：《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期：2022年第28卷第2期

页      面：365-371页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(21977092 21861142007)资助 

主　　题：氯氰碘柳胺钠 SHP2 肺癌 细胞衰老 

摘      要：含Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology region 2-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)具有调控细胞增殖分化、维持周期、调节免疫等功能,与众多肿瘤的发生发展密切相关.SHP2是RAS蛋白(ratsarcoma protein,RAS)信号通路的重要调控蛋白,研究表明抑制SHP2活性能减缓RAS突变肺癌的进展.因此筛选特异性的SHP2抑制剂,有助于为肺癌的治疗提供新的手段.通过建立不同蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase,PTP)体外筛选体系,从化合物文库中筛得SHP2特异性抑制剂氯氰碘柳胺钠(closantel sodium,CS),其IC_(50)值为84.83μmol/L.采用Western Blot检测CS对SHP2磷酸化的抑制作用;采用细胞热转移试验(cellular thermal shift assay,CETSA)检测在不同温度及浓度下CS对SHP2的热稳定性的影响;采用CCK8检测CS对人肺癌细胞A549、NCI-H358、NCI-H1944的细胞毒作用;采用β-半乳糖苷酶染色检测CS在无血清(0%)、低血清(3%)及常规血清(10%)3种条件下诱导肺癌细胞衰老表型.结果显示,CS可特异性抑制SHP2的活性,并显著抑制SHP2的磷酸化;在52-60℃的温度范围内,CS可稳定胞内SHP2构象,并具有浓度依赖性;CS可抑制肺癌细胞增殖,并具有浓度依赖性;10%血清条件下,CS作用使得细胞衰老表型显著增加,可诱导肺癌细胞衰老.本研究表明CS可通过抑制SHP2活性及磷酸化诱导肺癌细胞衰老、促进肺癌细胞死亡,结果可为开发新的治疗肺癌等疾病的特异性SHP2抑制剂提供新的化合物骨架.(图5表2参36)