二维电泳技术在大豆子叶微粒体膜结合蛋白研究中的应用

作     者：乞永艳 刘富海 Arnaud Bovy Jan Cordewener Froukje Vander Wal QI Yong-yan;LIU Fu-hai;Arnaud Bovy;Jan Cordewener;Froukie Vander Wal

作者机构：中国农业科学院蜜蜂研究所北京100093 北京天宝康高新技术开发有限公司北京100097 Plant Research InternationalP.O.Box 166700 AAWageningenthe Netherlands 

出 版 物：《大豆科学》 (Soybean Science)

年 卷 期：2007年第26卷第1期

页      面：11-15页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：荷兰瓦赫宁根大学"交叉研究和教育基金"项目 

主　　题：二维电泳 大豆 子叶 微粒体膜结合蛋白 

摘      要：以硝酸银诱导的大豆子叶为材料,初步探讨了二维电泳技术在分离大豆子叶微粒体膜结合蛋白中的应用,研究了重新水化溶液的组成、加样量、等电聚焦的total voltage hours以及不同pH梯度范围IPG(固相pH梯度)胶条等因素对膜蛋白的溶解和二维电泳图像的影响。结果表明对于70×3×0.5mmIPG胶条,能够溶解较多蛋白质和获得高质量二维电泳图像的优化条件为:由尿素、硫脲、三丁基膦和C7BZO组成的重新水化溶液(TUC7T2)、80μg的加样量和20000vhr的totalvoltage hour。在此优化条件下,与宽范围pH梯度IPG胶条相比,使用窄范围pH梯度胶条可以观察到更多的和质量更好的蛋白质点,结果发现至少有13个点只存在于硝酸银诱导的样品中,而不存在于对照中,其代表的蛋白质的等电点在4.0-8.0。