表达抗原Rv1255c的重组卡介苗的免疫原性研究

作     者：张天然 翁术锋 章金怡 粟海波 徐颖 ZHANG Tian-ran;WENG Shu-feng;ZHANG Jin-yi;SU Hai-bo;XU Ying

作者机构：复旦大学生命科学学院遗传系上海200438 

出 版 物：《微生物学免疫学进展》 (Progress In Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2022年第50卷第2期

页      面：9-16页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81971900) 广东省医学科学技术研究基金(B2017066) 

主　　题：重组卡介苗 先天性免疫 适应性免疫 结核分枝杆菌 Rv1255c抗原 

摘      要：目的 选取结核分枝杆菌RD10区抗原Rv1255c,构建重组卡介苗(rBCG::Rv1255c),评价其诱导先天性免疫和适应性免疫应答的能力。方法 通过分子克隆构建重组质粒pMV261-Rv1255c,将其电转进入BCG感受态细胞,通过蛋白印迹方法筛选得到表达Rv1255c的重组卡介苗;rBCG::Rv1255c腹腔免疫C57BL/6小鼠,在免疫后24 h和7 d,用ELISA、流式细胞术等方法检测吞噬细胞和淋巴细胞的比例、NO和H;O;的含量;rBCG::Rv1255c皮下免疫小鼠,在免疫后6周,用ELISA检测脾淋巴细胞分泌TNF-α、IFN-γ和IL-2的水平,用流式细胞术检测CD4;和CD8;T细胞分泌IFN-γ、IL-2的水平。结果 成功构建重组卡介苗rBCG::Rv1255c;腹腔免疫C57BL/6小鼠后,与BCG相比,rBCG::Rv1255c能够激活更强的先天性免疫应答,包括中性粒细胞数升高(P=0.000 1);NO(P=0.007 6,P0.01;P0.000 1)和H;O;(P=0.000 2,P0.001;P=0.035 5,P0.05)含量增加;同时rBCG::Rv1255c皮下免疫6周后的小鼠脾淋巴细胞针对特异抗原分泌更高水平的TNF-α(P0.000 1)、IFN-γ(P=0.009 8,P0.01)和IL-2(P=0.000 7,P0.001),CD4;和CD8;T细胞分泌更高水平的IFN-γ(P=0.002 7,P0.01)、IL-2(P=0.000 2,P0.001;P=0.025 9,P0.05)。这表明rBCG::Rv1255c可以更好地激活适应性免疫应答。结论 与BCG相比,rBCG::Rv1255c可以促进吞噬细胞的激活,增强TH1型细胞因子分泌,显示出良好的免疫原性,可作为潜在的抗结核疫苗进一步研究。