鸽圆环病毒Cap基因SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立及应用

作     者：韩晓语 杨俊杰 赵洪哲 郭昊 王亚新 温永俊 王凤雪 HAN Xiaoyu;YANG Junjie;ZHAO Hongzhe;GUO Hao;WANG Yaxin;WEN Yongjun;WANG Fengxue

作者机构：内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2024年第32卷第3期

页      面：95-101页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：内蒙古自治区自然科学基金项目(2020MS03047) 内蒙古农业大学高层次人才引进项目(NDGCC2016-22)。 

主　　题：Cap基因 鸽圆环病毒 实时定量PCR 

摘      要：为建立一种针对鸽圆环病毒(PiCV)的快速诊断方法,试验根据PiCV的Cap保守基因序列,设计合成一对特异性引物,建立了PiCV荧光定量PCR检测方法,对其敏感性、特异性、重复性进行评价并利用该方法对临床样本进行检测。结果表明:在最佳反应条件下,所建立的PiCV荧光定量PCR方法在1×10^(2)~1×10^(7) copies/μL标准品范围内具有良好的线性相关性,线性相关系数为0.9846;敏感性试验结果显示,该方法最低可检测到1×10^(2) copies/μL标准品,是常规PCR检测方法的100倍;特异性试验结果显示,该方法与其他常见的鸽病病原不发生交叉反应;重复性评价结果显示,批内与批间的变异系数均小于2%;所建立PiCV荧光定量PCR方法对临床病死鸽肝脏样品检测结果显示,PiCV阳性率达75.7%,高于常规PCR方法的检测阳性率(54.1%),说明该方法具有良好的适用性。可应用于对PiCV的快速检测,为PiCV的及时防控提供有力技术支持。