K亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定

作     者：孙鹏 陈孜孟 赵国梁 崔宁 祖铭 崔治中 苏帅 SUN Peng;CHEN Zi-meng;ZHAO Guo-liang;CUI Ning;ZU Ming;CUI Zhi-zhong;SU Shuai

作者机构：山东农业大学动物医学院泰安271018 山东省畜牧业贸易服务中心济南250000 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第43卷第2期

页      面：371-376页

学科分类：090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(311723309) 

主　　题：K亚群禽白血病病毒 gp85基因 表达 间接免疫荧光试验(IFA) 单因子血清 

摘      要：为了制备一种快速特异性识别K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的单因子血清,本试验将ALV-K接种DF1细胞,提取感染细胞DNA作为模板,PCR扩增1 005bp ALV-K-gp85和510bp ALV-K-gp85(fragment)基因。将其正确的阅读框插入表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达蛋白常规免疫昆明白小鼠制备抗血清。结果表明成功获得39.85和22.01ku的重组融合蛋白,且具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果表明两血清均可与ALV-K反应,而不与ALV-A、ALV-B和ALV-J反应。本试验首次研制获得能特异性识别ALV-K的单因子血清,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础。