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黄曲霉素产毒真菌ver-1、verB及ITS基因序列多重PCR体系的优化

Optimization of Multiplex PCR System for Aflatoxin Producing Fungi Based on ver-1,verB and ITS Genes

作     者:潘锋君 叶垚敏 张晓芹 PAN Fengjun;YE Yaomin;ZHANG Xiaoqin

作者机构:丽水市中心医院浙江丽水323000 丽水市中医院浙江丽水323000 

出 版 物:《中国现代应用药学》 (Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy)

年 卷 期:2022年第39卷第7期

页      面:912-917页

核心收录:

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基  金:浙江省基础公益研究计划项目(LGF19H280002)。 

主  题:黄曲霉素 产毒真菌 多重PCR 优化体系 

摘      要:目的对黄曲霉素产毒真菌的多重PCR体系进行优化,确定最佳PCR体系。方法以黄曲霉素产生过程中的主要调控基因ver-1、verB及通用基因片段ITS序列为目的片段,设计多重PCR引物,采用单因素和正交优化试验,对DNA模板、Mg^(2+)浓度、引物用量、dNTPs用量、退火温度等因素进行考察。结果最佳多重PCR体系为:50μL体系中含有引物(5μmol·L^(−1))3μL,dNTPs(2.5 mmol·L^(−1))5μL,Mg^(2+)(2.5 mmol·L^(−1))4μL,DNA浓度10 ng·μL^(−1),退火温度56℃。结论建立的体系可用于黄曲霉素产毒真菌的多重PCR鉴定,对黄曲霉产毒菌的源头鉴定具有一定的意义。

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