上皮细胞黏附因子对下咽癌FaDu细胞转移影响的研究

作     者：牟亚魁 于亮 逯素梅 洒娜 王海波 徐伟 MU Ya-kui;YU Liang;LU Su-mei;SA Na;WANG Hai-bo;XU Wei

作者机构：山东大学附属省立医院耳鼻咽喉头颈外科济南250021 山东省千佛山医院检验科 

出 版 物：《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 (Chinese Journal of Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery)

年 卷 期：2013年第48卷第12期

页      面：1022-1027页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：山东省科学技术发展计划项目(2010GHZ20202) 

主　　题：下咽肿瘤 RNA,小分子干扰 细胞黏附分子 抗原,肿瘤 细胞系,肿瘤 

摘      要：目的 研究小干扰RNA（siRNA）干扰上皮细胞黏附因子（epithelial cell adhesion molecule,EpCAM）表达对下咽癌FaDu细胞体外侵袭、迁移、克隆形成能力的影响,并分析其可能机制.方法 利用siRNA技术干扰FaDu细胞中EpCAM基因的表达;采用Transwell侵袭、迁移实验和平板克隆实验,分别检测干扰EpCAM表达对FaDu细胞侵袭、迁移及克隆形成能力的影响;借助Western blot检测干扰EpCAM表达对E-cadherin和β-catenin在细胞质及细胞骨架上表达的影响.结果 FaDu细胞转染EpCAM siRNA后,EpCAM在mRNA和蛋白水平表达较阴性对照组均显著下调（t =6.46,P0.05;t=10.25,P0.05）.侵袭实验显示：EpCAM siRNA组每个视野下平均细胞数目为（26.33 ±3.71）个,较FaDu组（61.47 ±6.70）个及阴性对照组（54.13 ±6.51）个下降明显,差异有统计学意义（t =7.95,t =6.42,P0.05）.迁移实验显示：EpCAM siRNA组每个视野下平均细胞数目为（79.87 ±8.44）个,低于FaDu组（167.53 ±11.49）个和阴性对照组（162.13±13.45）个,与阴性对照组相比差异有统计学意义（t =10.90,t=8.97,P0.05）.平板克隆实验中,EpCAM siRNA组平均克隆形成数目为（78.00 ±5.57）个,低于FaDu组（177.30±16.50）个和阴性对照组（173.67±13.50）个,差异具有统计学意义（=9.78,=11.35,P0.05）.Westem blot显示,EpCAM siRNA组E-cadherin和β-catenin在细胞骨架上表达水平显著升高,与阴性对照组相比差异均具有统计学意义（=4.58,P0.05;t =3.76,P0.05）;而在细胞质中表达则显著降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义（t =6.60,P0.05;t=8.20,P0.05）;在总蛋白水平,E-cadherin和β-catenin表达无明显变化.结论 干扰FaDu细胞中EpCAM基因的表达,抑制细胞的侵袭、迁移和克隆形成能力,其机制可能与调节E-cadherin和β-catenin在细胞骨架和细胞质中的表达有关,EpCAM基因有可能成为下咽癌基因治疗的新靶点.