用pGAP启动子在***中组成型表达cbhⅡ基因

作     者：易国辉 屠发志 张爱联 张添元 屈直 罗进贤 YI Guo-hui;TU Fa-zhi;ZHANG Ai-lian;ZHANG Tian-yuan;QU Zhi;LUO Jin-xian

作者机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室海口571101 海南大学农学院 中山大学基因工程教育部重点实验室/生物化学系广州510275 

出 版 物：《工业微生物》 (Industrial Microbiology)

年 卷 期：2010年第40卷第4期

页      面：29-33页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家863项目(No.2007AA021307) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(ITBBZX2008-4-2) 中国热带农业科学院科研基金项目(RKY0623) 

主　　题：纤维素二糖水解酶 毕赤酵母 基因表达 酶活力 

摘      要：用套叠PCR法扩增木霉的cbh Ⅱ基因,以EcoR I和Not I双酶切将其克隆进***表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP-cbh Ⅱ。通过电转法将其cbhⅡ基因重组于***基因组,筛选高G418抗性的克隆作为工程菌。用葡萄糖作为碳源摇瓶发酵3 d,分泌的重组蛋白CBHⅡ达到50 mg/L。用CMC酶活法测定发酵液中的CMC酶活力为2.05 U/mL。