Smad3基因siRNA对TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖的影响

作     者：李平 刘苹 陈星云 赵艳 宁亚蕾 杨楠 周元国 LI Ping;LIU Ping;CHEN Xing-Yun;ZHAO Yan;NING Ya-Lei;YANG Lan;ZHOU Yuan-Guo

作者机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2010年第30卷第4期

页      面：690-694,699页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(30801195) 973项目(G1999054205 2005cb522602) 

主　　题：Smad3基因 RNA干扰 TGF-β1 成纤维细胞 细胞增殖 

摘      要：目的构建大鼠Smad3基因特异性siRNA沉默质粒,并探讨其在TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖中的作用。方法构建大鼠Smad3基因沉默质粒,荧光纤维镜观察转染效率,定量PCR、免疫组化法检测Smad3基因和蛋白的变化,BrdU ELISA法和EMSA法分别检测转染siRNA及联合大小剂量TGF-β1刺激后细胞增殖和Smad3结合活性变化。结果沉默质粒转染效率为41.2%,瞬时转染后具有促增殖作用且与转染剂量成正比,并使其mRNA表达下调50%、蛋白表达明显降低,还可降低大小剂量TGF-β1双向调节细胞增殖和Smad3结合活性的变化程度。结论pSUPERSmad3沉默质粒构建成功,TGF-β1可通过调节Smad3来达到双向调节成纤维细胞增殖作用。