嗜肺军团菌重组蛋白momp-Linker-pip的重组质粒构建及鉴定

作     者：李亚蒙 王涛 张彩霞 宿振国 LI Ya-meng;WANG Tao;ZHANG Cai-xia;SU Zhen-guo

作者机构：滨州医学院附属医院检验科山东滨州256600 滨州医学院烟台附属医院检验科山东烟台264100 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2022年第32卷第5期

页      面：513-516,520页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：山东省自然科学基金(ZR2017PH014) 滨州医学院科研计划与科研启动基金(BY2016KJ05) 

主　　题：嗜肺军团菌 momp基因 pip基因 重组蛋白 

摘      要：目的利用自带Linker的引物,重组嗜肺军团菌pip和momp基因,构建其重组质粒pET-MLP,以获得其原核细胞表达产物并进行鉴定。方法首先制备足量的pET-pip、pET-momp以及空质粒pET-32a(+);通过PCR扩增pip、momp基因,将其定向克隆至pET-32a(+)并进行纯化筛选和鉴定;最后利用含有Linker的引物,将重组质粒pET-pip和pET-momp基因进行连接,完成pET-MLP的构建、筛选和鉴定。结果利用PCR、限制性核酸酶切电泳进行结果鉴定,于NCBI中将重组质粒的核酸序列与LP1型军团菌的相应序列对比,结果表明其同源性达到98%。结论实验成功构建、表达了重组质粒pET-MLP,为下一步以重组蛋白MLP作为诊断抗原进行嗜肺军团菌血清学检测奠定了基础。