加味独活寄生合剂对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨组织细胞自噬及凋亡相关蛋白的影响

作     者：曾凡 陈柏屹 王康 段航 邝高艳 卢敏 ZENG Fan;CHENG Baiyi;WANG Kang;DUAN Hang;KUANG Gaoyan;LU Min

作者机构：湖南中医药大学湖南省长沙市410208 湖南中医药大学第一附属医院 湖南省怀化市中医院 

出 版 物：《中医杂志》 (Journal of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2022年第63卷第8期

页      面：773-780页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81874476) 

主　　题：膝骨关节炎 加味独活寄生合剂 自噬 细胞凋亡 

摘      要：目的 探讨加味独活寄生合剂治疗膝骨关节炎的可能作用机制。方法 46只雄性新西兰大白兔随机分为空白组(8只)、常规模型组(19只)和3MA自噬抑制剂造模组(19只)。常规模型组使用高分子树脂石膏绷带固定兔右侧后肢建立膝骨关节炎模型,3MA自噬抑制剂造模组在上述造模基础上加用自噬抑制剂3MA关节腔注射造模,造模周期为6周,两个造模组均造模成功各16只。将常规造模组分为模型组和加味独活寄生合剂组,3MA自噬抑制剂组分为3MA组和3MA+加味独活寄生合剂组,每组8只。加味独活寄生合剂组和3MA+加味独活寄生合剂组均给予加味独活寄生合剂单次生药量为2.26 g/kg灌胃,其余各组予以3.4 ml/kg蒸馏水灌胃,每日2次,持续4周。给药结束后观察各组兔膝关节软骨大体情况,苏木素-伊红(HE)染色检测软骨组织病理学变化,并分别通过Pelletier评分、Mankin评分进行量化评估;检测各组兔关节软骨组织中自噬相关蛋白[自噬相关基因7 (ATG7)、自噬关键分子酵母Atg6同系物1 (Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3 (LC3)]及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3 (Caspase3)]mRNA及蛋白表达水平。结果 与空白组比较,模型组兔膝关节软骨病理损伤明显,Pelletier评分及Mankin评分升高,软骨组织中Beclin-1、LC3、ATG7、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达均升高,Beclin-1、LC3、ATG7、Caspase-3蛋白表达升高(P0.05或P0.01)。与模型组比较,加味独活寄生合剂组关节软骨损伤改善,Pelletier评分及Mankin评分降低,软骨组织中Beclin-1、 LC3、 ATG7、 Bcl-2 mRNA及蛋白表达升高,Caspase-3 mRNA及蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。与加味独活寄生合剂组比较,3MA+加味独活寄生合剂组Pelletier评分、Mankin评分升高,软骨组织中Beclin-1、LC3、ATG7、Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低,Caspase-3 mRNA表达升高(P0.05或P0.01)。结论 加味独活寄生合剂对膝骨关节兔的关节软骨具有保护作用,其机制可能是通过诱导软骨组织自噬、抑制细胞凋亡实现的。