双硫仑靶向Wnt和AKT信号通路降低卵巢癌细胞的恶性程度及对顺铂的耐受性

作     者：高瑞 唐杰 朱炜 周芸 GAO Rui;TANG Jie;ZHU Wei;ZHOU Yun

作者机构：深圳市罗湖区人民医院广东深圳518005 

出 版 物：《深圳中西医结合杂志》 (Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine)

年 卷 期：2022年第32卷第1期

页      面：11-15,I0002,I0003,F0003页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：深圳市罗湖区软科学研究计划项目(201813)。 

主　　题：卵巢癌 双硫仑 顺铂 Wnt PI3K/AKT/mTOR 

摘      要：目的:探究双硫仑(DSF)对人卵巢癌细胞恶性程度及其对化疗药物敏感性的影响及相关机制。方法:使用不同浓度DSF(0.1μmol·L^(-1)、1μmol·L^(-1)、5μmol·L^(-1))处理卵巢癌细胞SK–OV–3和A278,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)测定细胞活性。选取DSF有效浓度(5μmol·L^(-1))处理细胞,通过软琼脂糖克隆形成实验、微球形成实验检测干细胞特性,Transwell实验检测细胞迁移,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测Wnt靶基因的信使核糖核酸(mRNA)表达,双荧光素酶法检测Wnt通路的转录活性,免疫印迹实验检测PI3K/AKT/mTOR和RAF/MEK/ERK的激活情况。采用DSF(5μmol·L^(-1))和顺铂联合处理SK–OV–3和A2780细胞,并使用MTT实验、软琼脂糖克隆形成实验和微球形成实验检测DSF对顺铂药物敏感性的影响。结果:与对照组相比,DSF处理能够显著降低卵巢癌细胞的增殖能力(P0.01),降低软琼脂糖中癌细胞克隆形成能力(P0.01),抑制卵巢癌细胞在悬浮培养下的微球形成(P0.01)以及细胞的迁移能力(P0.01),从而降低卵巢癌细胞的恶性程度。在与顺铂药物联合使用情况下,DSF联合用药显著增强卵巢癌细胞对顺铂药物的敏感性(P0.01)。机制方面的研究表明DSF处理显著降低卵巢癌细胞中Wnt信号通路活性,同时显著抑制卵巢癌细胞中RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR通路的激活。结论:DSF处理可显著降低卵巢癌细胞的恶性程度,同时增强其对传统化疗药物顺铂的敏感性。DSF抑癌作用可能是通过抑制Wnt、RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR等癌症促进信号通路的活性来实现的。