枸杞多糖在siNrf2胸主动脉血管内皮细胞氧化应激 损伤中的作用

作     者：朱玲勤 胡小辉 高媛媛 薛姝婧 李光华 ZHU Lingqin;HU Xiaohui;GAO Yuanyuan;XUE Shujing;LI Guanghua

作者机构：宁夏医科大学公共卫生与管理学院银川700004 宁夏医科大学基础医学院生理学系银川750004 

出 版 物：《宁夏医科大学学报》 (Journal of Ningxia Medical University)

年 卷 期：2022年第44卷第1期

页      面：11-16页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(82060050) 宁夏医科大学校级科研项目(XY2020017 XM2019001) 

主　　题：小干扰RNA 内皮细胞 氧化应激 Keap1/Nrf2信号通路 枸杞多糖 

摘      要：目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导主动脉血管内皮细胞氧化应激损伤的保护机制。方法通过应用小干扰RNA[siRNA(50 nmol)]转染大鼠胸主动脉内皮细胞(rat thoracic aortic endothelial cell,RTAEC),对Nrf2进行基因沉默,检测转染效率、筛选最佳siRNA后,对沉默Nrf2基因分组:空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+LBP组、沉默空载组(siNC组)、siNC+AngⅡ+LBP组、沉默Nrf2组(siRNA组)、siRNA+AngⅡ+LBP组。Western blot检测Nrf2、P-Nrf2的蛋白表达水平在AngⅡ+LBP组与siRNA+AngⅡ+LBP组的变化。ELISA检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)的含量变化。结果转染效率检测结果显示:荧光显微镜下观察到带有荧光标记的siRNA转染内皮细胞的效率在80%以上。与空白对照组比较,siRNA5组的Nrf2蛋白表达降低(P0.05)。与空白对照组比较,siRNA5组的Nrf2的mRNA表达降低(P0.05)。转染目的siRNA实验结果显示:与AngⅡ+LBP组比较,siRNA+AngⅡ+LBP组的Nrf2蛋白表达下降(P0.05)。与AngⅡ+LBP组比较,siRNA+AngⅡ+LBP组的MDA的表达水平升高(P0.05),GSH、CAT、T-AOC的表达水平降低(P均0.01)。结论LBP可能通过增加内皮细胞中Nrf2的蛋白表达水平,提高其抗氧化应激能力,达到保护血管内皮细胞功能的作用。