过氧化氢损伤原代皮质神经元中PPARγ的改变

作     者：王宁 韩晶 徐艳炜 梁浩 程焱 孙莉 Wang Ning;Han Jing;Xu Yanwei;Liang Hao;Cheng Yan;Sun Li

作者机构：天津医科大学总医院300052 天津市神经病学研究所教育部"中枢神经系统创伤修复与再生"重点实验室300052 天津市"神经损伤变异与再生"重点实验室300052 

出 版 物：《中华医学杂志》 (National Medical Journal of China)

年 卷 期：2015年第95卷第21期

页      面：1686-1690页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81070968,81401023) 天津市科委重点项目(13ZCZDSY01900) 

主　　题：H2O2 PPARγ 磷酸化 皮质神经元 

摘      要：目的 在原代培养皮质神经元中,观察过氧化氢（H2 O2）损伤是否诱导了过氧化物酶体增殖物激活受体γ （PPARγ）的磷酸化修饰及活性改变,从调节PPARγ的角度探讨H2 O2的损伤机制.方法 体外原代培养SD大鼠皮质神经元,完全随机分为正常对照组、H2O2损伤组（分别给予250、500、750 μmol/L H2O2作用2h）、U0126（ERK1/2激活抑制剂）组（10 μmol/L U0126预处理30min后给予500 μmol/L H2O2作用2h）,采用细胞形态学观察、MTT法测定细胞存活率、锥虫蓝染色测定细胞死亡率、Western印迹法检测PPARγ、p-PPARγ（磷酸化的PPARγ）蛋白表达水平及PPARγ的核移位（即PPARγ活性）的改变.结果 （1）与正常对照组相比,经不同浓度（250、500、750 μmol/L） H2O2损伤2h后,神经元相对存活率降低（74.8％±5.2％、53.6％±6.7％和26.5％±5.8％,均P0.05）,死亡率增加（正常对照组6.6％±1.0％,H2 O2损伤组23.1％±2.8％、48.2％±4.1％、75.9％±4.4％,均P0.05）.（2）与正常对照组相比,H2O2 500μmol/L损伤组神经元PPARγ蛋白表达无明显变化（正常对照组1.25±0.07,H2 O2损伤组1.16±0.08,t=1.44,P0.05）,而p-PPARγ蛋白表达增加（正常对照组0.90 ±0.04,H2O2损伤组1.26±0.09,t=-6.48,P0.05）.同时PPARγ胞质蛋白表达增加（正常对照组0.49±0.04,H2O2损伤组0.77±0.03,t=-10.35,P0.05）,胞核蛋白表达下降（正常对照组0.76±0.03,H2 O2损伤组0.20±0.06,t=14.82,P0.05）（即核移位下降）.（3）与H2 O2损伤组相比,抑制ERK1/2激活降低p-PPARγ蛋白表达水平（H2O2损伤组0.85±0.05,U0126组0.42±0.14,t =4.91,P0.05）、增加PPARγ核移位（胞质损伤组1.03±0.16,U0126组0.60±0.04,t=4.58,P0.05;胞核损伤组0.16±0.04,U0126组0.87±0.11,t=-10.41,P0.05）,同时增加神经元存活率（70.8％±1.3％,P0.05）,降低神经元死亡率（29.8％±3.4％,P0.05）.结论 原代皮质神经元中,PPARγ的磷酸化参与了H2 O2的细胞损伤机制.