双特异性磷酸酶5对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响
Effect of dual specificity phosphatase 5 on proliferation and apoptosis in human placental trophoblast cell line BeWo作者机构:第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科重庆400042 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038
出 版 物:《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)
年 卷 期:2014年第36卷第7期
页 面:659-663页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 071008[理学-发育生物学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
主 题:双特异性磷酸酶5 BeWo细胞 细胞增殖 细胞凋亡 ERK1 2信号通路
摘 要:目的探讨双特异性磷酸酶5(dual specificity phosphatase 5,DUSP5)基因过表达对人胎盘滋养层细胞系BeWo增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法以携带人DUSP5基因的重组慢病毒感染BeWo细胞,用流式细胞仪分选建立过表达DUSP5的BeWo细胞模型,以携带空载体的慢病毒感染的细胞以及未经任何处理的细胞作对照。经荧光实时定量PCR和Western blot检测DUSP5基因mRNA和蛋白的表达,经CCK-8实验和流式细胞术检测BeWo细胞增殖和凋亡的变化,经Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、p-p38及p-JNK的变化。结果①经荧光实时定量PCR和Western blot证实,成功构建了DUSP5过表达的人胎盘滋养层细胞BeWo细胞模型;②CCK-8实验结果显示DUSP5过表达组在第3、4、5天的光密度值D(490)与其他两对照组相比明显增高(P0.01);流式细胞仪结果显示顺铂作用48 h后,DUSP5过表达组与空病毒载体组相比,正常细胞的百分比显著增加而早期凋亡细胞百分比则显著减少(P0.01);Western blot结果显示DUSP5过表达组中p-ERK1/2水平显著下降,而p-p38和p-JNK未见明显变化。结论 DUSP5可促进人胎盘滋养细胞系BeWo增殖、抑制细胞凋亡,以上作用可能与DUSP5抑制ERK信号通路有关。