槲皮素抑制TREM-1激活巨噬细胞炎症反应及减轻LPS诱导小鼠急性肺损伤的研究

作     者：马丽 董良 游志坚 黄一丹 Ma Li;Dong Liang;You Zhijian;Huang Yidan

作者机构：广西壮族自治区柳州市人民医院麻醉科柳州545006 

出 版 物：《中国医师杂志》 (Journal of Chinese Physician)

年 卷 期：2022年第24卷第2期

页      面：206-211页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金(81760019) 广西壮族自治区卫健委自筹经费科研课题(Z20210219)。 

主　　题：槲皮素 巨噬细胞 急性肺损伤 炎症 

摘      要：目的观察槲皮素(QUE)对骨髓细胞上表达的触发受体1(TREM-1)激活巨噬细胞炎症反应及脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用,并探讨其可能机制。方法体外细胞实验:腹腔注射3%硫醇乙酸钙收集小鼠原代腹腔巨噬细胞,将收集的细胞分为:空白对照组、DMSO溶媒组、TREM-1激动剂(anti-Trem-1)组(10μg/ml)、QUE组(10μmol/L)及TREM-1激动剂+QUE组(于加激动剂前,用10μmol/L QUE预处理细胞30 min)。采用ELISA法检测原代巨噬细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌;为观察QUE对LPS诱导巨噬细胞TREM-1表达的影响,将巨噬细胞分为:对照组、LPS组(100 ng/ml)及LPS+QUE组(10μmol/L QUE预处理后再加入100 ng/ml LPS),收集提取蛋白,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测TREM-1蛋白的表达。动物实验:将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、ALI模型组、QUE组、QUE治疗组,每组20只。ALI模型组气管内注射LPS 5 mg/kg构建小鼠ALI模型,QUE治疗组气管内注射LPS 5 mg/kg构建小鼠ALI模型,之后腹腔注射QUE 15 mg/kg;对照组气管内给予等量生理盐水,之后腹腔注射DMSO;QUE组气管内给予等量生理盐水,之后腹腔注射QUE 15 mg/kg;HE染色观察各组小鼠肺组织病理改变;计数各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BLAF)中炎症细胞及IL-1β、TNF-α和IL-6含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组小鼠肺组织中TREM-1 mRNA和蛋白的表达。结果在体外细胞实验中,TREM-1激动剂组原代巨噬细胞上清液中IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌高于DMSO溶解组(均P0.001),而TREM-1激动剂+QUE组巨噬细胞IL-1β、TNF-α和IL-6分泌低于TREM-1激动剂组(均P0.001)。LPS组TREM-1蛋白表达高于对照组(P0.05),而LPS+QUE组TREM-1蛋白表达低于LPS组(P0.05)。动物实验发现,与对照组相比,ALI模型组小鼠肺组织病理损伤评分,BALF中总细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的数量,TNF-α、IL-6、IL-1β含量均明显增加(均P0.001);QUE治疗组上述指标均低于ALI模型组(均P0.001)。qRT-PCR及Western blot结果发现:与对照组相比,ALI模型组小鼠肺组织内TREM-1 mRNA和蛋白的表达均增加,而QUE治疗组小鼠肺组织内TREM-1 mRNA和蛋白的表达低于ALI模型组(均P0.05)。结论QUE可抑制TREM-1激活减轻巨噬细胞炎症反应及LPS诱导的小鼠急性肺损伤。