在鱼腥藻7120中建立反义glnA系统

作     者：秦京东 施定基 徐旭东 张金栋 郭平仲 汤佩松 

作者机构：中国科学院植物研究所 美国密执安州立大学国家植物学实验室 首都师范大学生物系北京100037 

出 版 物：《植物生理学报（0257-4829)》 (Acta Phytophysiologica Sinica)

年 卷 期：1998年第24卷第3期

页      面：225-232页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071001[理学-植物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金 

主　　题：反义glnA系统 GS 鱼腥藻7120 泌氨 代谢调控 

摘      要：应用反义技术对鱼腥藻7120切的内源glnA基因的表达进行调控，首次获得了人工反义系统的蓝藻品系。先从编码谷酰胺合成酶（GS）的基因glnA中取得部分结构基因片段，与表达质粒载体pRL-439及穿梭质粒载体pDC－8相连接。通过酶切鉴定筛选出反向克隆的穿梭表达质粒pDC－AM，然后应用三亲接合转移法把它转入鱼腥藻对7120.通过新霉素筛选，酶谱鉴定，斑点杂交，质粒的交叉转化以及内源glnA基因表达的GS活性分析，GS相关的胞外泌氨分析及所获藻株的形态学变化，证明已在鱼腥藻7120中建立了人工反义glnA基因的品系。