N-乙酰半胱氨酸对尼古丁诱导的MC3T3-E1细胞凋亡的作用及其机制

作     者：崔磊华 侯玉帛 苏畅 李明贺 聂鑫 CUI Leihua;HOU Yubo;SU Chang;LI Minghe;NIE Xin

作者机构：温州医科大学附属口腔医院口腔颌面外科浙江温州325000 温州医科大学附属口腔医院牙周科浙江温州325000 吉林大学口腔医院口腔颌面外科吉林长春130021 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2022年第48卷第1期

页      面：26-32页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 071009[理学-细胞生物学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(51972240) 浙江省教育厅一般科研项目(Y201942009) 浙江省温州市科技局基础性科研项目(Y20180700,Y20180699)。 

主　　题：MC3T3-E1细胞 尼古丁 N-乙酰半胱氨酸 细胞凋亡 氧化应激 

摘      要：目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对尼古丁诱导的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养MC3T3-E1细胞,采用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0和7.5 mmol·L^(-1))尼古丁诱导MC3T3-E1细胞损伤,采用MTT法检测各组MC3T3-E1细胞增殖活性,并确定尼古丁半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)值将MC3T3-E1细胞分为对照组、尼古丁组和尼古丁+不同浓度(2.5、5.0和7.5 mmol·L^(-1))NAC组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,以确定NAC最适作用浓度。将细胞分为对照组、尼古丁(4.25 mmol·L^(-1))组、NAC(5.0 mmol·L^(-1))组和尼古丁(4.25 mmol·L^(-1))+NAC(5.0 mmol·L^(-1))组,采用MitoSOX荧光染色法检测各组细胞中线粒体来源活性氧簇(mitoROS)水平,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,并计算Bax/Bcl-2比值。结果:与0 mmol·L^(-1)尼古丁组比较,不同浓度尼古丁组细胞增殖活性明显降低(P0.05),且呈浓度依赖性。尼古丁的IC_(50)值为(4.25±0.03)mmol·L^(-1)。与对照组比较,尼古丁组细胞增殖活性明显降低(P0.05);与尼古丁组比较,尼古丁+不同浓度NAC组细胞增殖活性明显升高(P0.05),尼古丁+5.0 mmol·L^(-1) NAC组细胞增殖活性升高最明显。与对照组比较,尼古丁组细胞中mitoROS水平明显升高(P0.05),细胞凋亡率明显升高(P0.05),细胞中Bax/Bcl-2比值明显升高(P0.05);与尼古丁组比较,NAC组和尼古丁+NAC组细胞中mitoROS水平明显降低(P0.05),细胞凋亡率明显降低(P0.05),尼古丁+NAC组细胞中Bax/Bcl-2比值明显降低(P0.05)。结论:NAC可缓解尼古丁诱导的MC3T3-E1细胞凋亡,其作用机制可能与线粒体氧化应激有关。