禽白血病病毒K亚群HB2018003株感染性克隆构建

作     者：陈雪阳 王后坤 朱丽霖 方春 梁雄燕 杨玉莹 CHEN Xueyang;WANG Houkun;ZHU Lilin;FANG Chun;LIANG Xiongyan;YANG Yuying

作者机构：长江大学动物科学学院湖北荆州434025 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2022年第54卷第2期

页      面：107-111页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31972646) 荆州科技计划项目(2020CB-31) 湖北省教育厅科学技术研究计划项目(B2019028) 

主　　题：K亚群禽白血病病毒 感染性克隆 病毒拯救 

摘      要：为了获得背景明确清晰的禽白血病病毒K亚群(ALV-K)毒株,对地方性ALV-K毒株HB2018003采用酶切和同源重组两种方法进行感染性克隆构建及病毒拯救。使用PCR方法获得目的基因,经酶切、连接和同源重组后成功构建重组质粒Topo-003-ABC和Topo-003-K12,测序结果表明无任何突变,进而将重组质粒转染进鸡胚成纤维细胞(DF-1)中,经群特异性抗原P27 ELISA、PCR和间接免疫荧光(IFA)鉴定,结果均表明成功拯救出病毒,将其命名为R-rHB2018003(同源重组法)和E-rHB2018003(酶切法)。本研究为深入探讨ALV-K的致病机制奠定了基础。