噬菌体随机肽库筛选HPV45亚型L1蛋白抗原表位

作     者：彭亚允 栗宁 陈玉梅 周景明 刘红亮 祁艳华 梁超 丁培阳 朱习芳 王爱萍 PENG Yayun;LI Ning;CHEN Yumei;ZHOU Jingming;LIU Hongliang;QI Yanhua;LIANG Chao;DING Peiyang;ZHU Xifang;WANG Aiping

作者机构：郑州大学生命科学学院河南郑州450001 

出 版 物：《郑州大学学报（理学版）》 (Journal of Zhengzhou University:Natural Science Edition)

年 卷 期：2022年第54卷第1期

页      面：88-94页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：河南省高校科技创新团队计划项目(19IRTSTHN006) 郑州市智汇郑州·1125聚才计划。 

主　　题：人乳头瘤病毒 L1蛋白 单克隆抗体 噬菌体展示技术 表位 

摘      要：高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)可诱发女性宫颈癌,HPV45是HPV主要高危亚型之一,L1蛋白是主要的保护性蛋白。以大肠杆菌表达、纯化获得的重组蛋白SUMO-45 L1作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗HPV45 L1蛋白的单克隆抗体,并以单克隆抗体3C11为靶分子,使用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行亲和淘选,三轮筛选后挑选12个与单抗3C11反应较强的克隆进行测序并分析。结果表明,噬菌体所展示的氨基酸序列与HPV45 L1蛋白序列“381VPNTYD386相同,将其进行肽的合成,并通过斑点-酶联免疫吸附测定(dot enzyme-linked immunosorbent assay,Dot-ELISA)和间接竞争ELISA鉴定,最终鉴定出单克隆抗体3C11识别的L1蛋白线性表位“381VPNTYD386。该表位的鉴定,为进一步分析HPV45 L1蛋白的结构和功能关系奠定了基础。