三甲胺与甲萘醌联用对VSMCs增殖及HUVECs内胆固醇含量的影响

作     者：周飒 单静博 薛佳敏 汪云阳 马文建 ZHOU Sa;SHAN Jingbo;XUE Jiamin;WANG Yunyang;MA Wenjian

作者机构：天津科技大学生物工程学院天津300457 齐鲁理工学院化学与生物工程学院山东济南250200 

出 版 物：《沈阳药科大学学报》 (Journal of Shenyang Pharmaceutical University)

年 卷 期：2022年第39卷第1期

页      面：60-67页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2017YFD0400304) 国家自然科学基金资助项目(31900233) 山东省自然科学基金资助项目(ZR2018BC010) 

主　　题：三甲胺 甲萘醌 细胞增殖 细胞迁移 胆固醇 

摘      要：目的探究三甲胺(trimethylamine,TMA)与甲萘醌单独用药及联合用药对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的增殖、迁移能力及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)内胆固醇含量的影响。方法首先采用MTT法检测不同浓度TMA对VSMC及HUVEC增殖的影响;划痕实验和Transwell检测TMA与甲萘醌单独用药及联合用药对VSMC迁移能力的影响;DCFH-DA荧光探针法检测VSMC内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot法检测VSMC中MMP9、PCNA、SM22α的蛋白水平;ELISA法检测HUVEC内总胆固醇(cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量。结果不同浓度的TMA对VSMC及HUVEC的生长并无明显的影响。与单独用药相比,TMA与低剂量的甲萘醌联合用药可明显促进VSMC迁移与增殖,提高胞内ROS水平,上调VSMC内MMP9及增殖型标志基因PCNA的蛋白表达,同时下调VSMC内分化型标志基因SM22α的蛋白表达。与TMA和低剂量的甲萘醌联合用药组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)、TMA和甲萘醌联合处理组可明显降低VSMC内ROS水平,下调VSMC内MMP9及PCNA的蛋白表达,上调VSMC内SM22α的蛋白表达。TMA与低剂量的甲萘醌联合用药还可以明显提高HUVEC内TC、HDL-C及LDL-C的含量。结论TMA自身对于VSMC和HUVEC并无显著影响,加入甲萘醌后,联合用药会诱导VSMC表型转化,提高HUVEC内胆固醇含量。同时NAC可缓解TMA与低剂量甲萘醌联合用药对VSMC造成的影响。提示联合用药可能通过影响ROS水平增加动脉粥样硬化发生的风险。