枸杞属AFLP分析体系优化与建立

作     者：戴国礼 曹有龙 安巍 赵建华 周军 DAI Guoli;CAO Youlong;AN Wei;ZHAO Jianhua;ZHOU Jun

作者机构：宁夏枸杞工程技术研究中心宁夏银川750004 西南林学院资源学院云南昆明650224 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica)

年 卷 期：2009年第18卷第3期

页      面：166-171页

学科分类：09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 

基　　金：国家科技支撑计划子课题(2006BAI09BO1-5) 国家自然基金项目(30760127) 

主　　题：枸杞属 AFLP 反应体系 AFLP的优化与建立 

摘      要：以枸杞属种质资源为试材，对AFLP分析过程中包括DNA的提取质量和浓度、Mse I／EcoR I以及T4DNA连接酶的浓度、反应时间等影响因素进行了研究。建立了一种适于枸杞AFLP银染技术的优化体系。该体系中各优化因素为：模板DNA的用量为300-400ng，酶切体系中Mse I和EcoR I各加入3U，T4 DNA连接酶加入2．0U，采用酶切与连接在同一体系中一步完成，其酶切温度为37℃，反应时间为5h。与22℃连接过夜。并对预扩增、选择性扩增和银染的效果进行了检测，以引物M＋CAC／E＋AGG构建了枸杞种质资源的AFLP指纹图谱，该图谱扩增带多，多态性强，且质量好。