基于响应面设计茎段形成层培养猕猴桃幼苗的优化研究

作     者：段新钰 郭婷语 王朝兰 申婷 严胜柒 张云峰 DUAN Xinyu;GUO Tingyu;WANG Chaolan;SHEN Ting;YAN Shengqi;ZHANG Yunfeng

作者机构：云南师范大学生命科学学院昆明650500 生物能源持续开发利用教育部工程中心昆明650500 

出 版 物：《广西植物》 (Guihaia)

年 卷 期：2021年第41卷第12期

页      面：2091-2099页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0902[农学-园艺学] 090102[农学-作物遗传育种] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家自然科学基金(30660075,31960066) 云南省自然科学基金(2009CD052) 云南师范大学大学生科研训练基金(ky2018-132) 

主　　题：猕猴桃 组培快繁 干细胞 茎段形成层 响应面设计软件 

摘      要：为降低猕猴桃组培快繁中的污染率,提高其繁殖效率,该文以猕猴桃的幼嫩茎段为外植体,采用两步培养法进行茎段形成层的愈伤及成苗诱导研究,并利用响应面设计软件对NAA浓度、6-BA浓度、低渗处理时间进行了各条件的优化,同时通过组织切片确定愈伤的来源及幼苗的形成方式。结果表明:(1)培养过程中撕除茎段周皮能显著降低污染率,用200~400 mg·L^(-1)的PVP处理猕猴桃茎段可有效防止去皮茎段的褐化。(2)愈伤诱导的最佳条件为预培养28.3 h、NAA 4.45 mg·L^(-1)、6-BA 0.28 mg·L^(-1),而幼苗形成的最佳条件为预培养26.4 h、NAA 4.84 mg·L^(-1)、6-BA 0.42 mg·L^(-1)。这表明形成层愈伤诱导需较长低渗处理时间和较高生长素,而成苗诱导则需较高生长素、激动素及较短的低渗处理时间。(3)组织切片观察结果表明猕猴桃愈伤组织源于形成层干细胞的分裂,且幼苗株源于胚状体的发育。综上结果表明,通过除去猕猴桃嫩茎周皮,外加抗氧化、低渗处理,可有效降低猕猴桃组培快繁中的污染率,提高繁殖系数和胚状体发生率,为猕猴桃种苗的规模化生产提供技术支撑。