缺失pk-1影响AcMNPV启动子表达的分析

作     者：赵淑玲 戴雪娟 薛亚男 郝佳慧 Shuling Zhao;Xuejuan Dai;Yanan Xue;Jiahui Hao

作者机构：扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2015年第25卷第4期

页      面：330-333页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：江苏省自然科学基金项目("水稻条纹病毒的传毒相关蛋白在病毒介体传播中的功能研究" No.BK20130441)资助 

主　　题：AcMNPV pk-1 启动子 表达 

摘      要：[目的]分析缺失pk-1对AcMNPV早期、晚期及极晚期基因表达的影响。[方法]将egfp基因片段分别插入到pFastBacDual载体上的p10和ph启动子下游,得到供体质粒pBac-Pp10-egfp和pBac-Pph-egfp。PCR扩增ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39启动子片段,插入到pBac-egfp载体上的egfp基因上游,得到供体质粒pBac-Pie1-egfp、pBac-Pie2-egfp、pBac-Plef2-egfp、pBac-Pp6.9-egfp、pBac-Pvp39-egfp。将供体质粒分别转化含缺失pk-1基因的AcMNPV bacmid和Helper质粒的大肠杆菌DH10Bac中,得到一系列重组的AcMNPV bacmid。提取Bacmid DNA,转染Sf9细胞,转染120h后荧光显微镜下观察eGFP蛋白的表达。[结果]缺失pk-1后ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39、p10、ph启动子均能启动下游egfp基因的表达。[结论]缺失pk-1不影响ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39、p10、ph启动子启动的基因表达。