基于TLR4/NF-κB途径探究左西孟旦调控巨噬细胞极化减轻动脉粥样硬化的作用

作     者：冯伟 魏海燕 师艳艳 FENG Wei;WEI Haiyan;SHI Yanyan

作者机构：喀什地区第一人民医院冠心病二科新疆喀什844000 喀什地区第一人民医院药学部新疆喀什844000 

出 版 物：《药物评价研究》 (Drug Evaluation Research)

年 卷 期：2021年第44卷第12期

页      面：2578-2586页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2019D01C005)。 

主　　题：动脉粥样硬化 巨噬细胞极化 左西孟旦 TLR4/NF-κB信号通路 

摘      要：目的通过探究左西孟旦对巨噬细胞极化的影响,观察其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法将45只健康清洁级ApoE-/-小鼠按照数字表法随机分为模型组、左西孟旦(2 mg/kg)组、左西孟旦(2 mg/kg)+脂多糖[LPS,2 mg/kg,Toll样受体4(TLR4)激动剂]组,每组15只,以高脂饲料喂养;取15只健康清洁级C57BL/6小鼠作为对照组,以普通饲料喂养。喂养8周后,ip给药,模型组和对照组ip等体积生理盐水,每天1次,持续4周。全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;HE染色与Masson染色观察主动脉组织形态变化与纤维化水平,油红O染色检测全主动脉及主动脉根部动脉斑块形成情况;免疫组织化学染色检测主动脉M1型标记蛋白诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与M2型标记蛋白分化群206 (CD206)的表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测主动脉M1型巨噬细胞相关基因肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)与M2型巨噬细胞相关基因转化生长因子-β(TGF-β)、精氨酸-1(Arg-1)的表达;Western blotting检测主动脉TLR4与磷酸化的核转录因子kB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠血清TG、TC和LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低(P0.05);主动脉内膜增厚,斑块面积显著增加,伴随大量纤维化(P0.05);iNOS阳性细胞比例显著升高,CD206阳性细胞比例显著下降(P0.05);TNF-α、IL-6 mRNA水平显著上调,TGF-β、Arg-1 mRNA水平显著下调(P0.05);同时TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达显著上调(P0.05)。与模型组比较,左西孟旦组小鼠血清TG、TC和LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著升高(P0.05);主动脉病理现象减轻,斑块面积显著减小,纤维化程度显著变小(P0.05);iNOS阳性细胞比例显著下降而CD206阳性细胞比例显著升高(P0.05);TNF-α、IL-6 mRNA水平显著下调,TGF-β、Arg-1 mRNA水平显著上调(P0.05);TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达显著下调(P0.05)。与LPS联用基本抵消左西孟旦对上述病理现象的改善作用。结论左西孟旦能够抑制TLR4的表达,阻止下游NF-κB信号途径的激活,调控巨噬细胞极化状态,从而发挥抗AS的作用。