普通肝素减少组蛋白诱导的小鼠肺组织多糖包被降解

作     者：付似凤 马晓春 李旭 FU Si-feng;MA Xiao-chun;LI Xu

作者机构：中国医科大学附属第一医院重症医学科辽宁沈阳110001 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2021年第37卷第11期

页      面：2016-2023页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81671936)。 

主　　题：组蛋白 普通肝素 多糖包被 黏结蛋白聚糖1 脓毒症 

摘      要：目的:观察组蛋白对小鼠肺组织多糖包被(glycocalyx)的影响,并探讨普通肝素的保护作用。方法:将32只8~12周龄雄性C57BL/6小鼠按随机数字表分为对照组、普通肝素组、组蛋白组和组蛋白+普通肝素组,每组8只。组蛋白组经小鼠尾静脉注射组蛋白50 mg/kg;组蛋白+普通肝素组在给予组蛋白1 h后经尾静脉注射普通肝素400 U/kg;普通肝素组给予普通肝素400 U/kg;对照组均给予等量生理盐水。于组蛋白注射4 h后取小鼠双肺,苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变,并进行肺组织病理学评分;采用RT-qPCR测定肺组织组织因子(tissue factor,TF)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)和黏结蛋白聚糖1(syndecan-1)的mRNA表达水平;采用Western blot测定肺组织syndecan-1的蛋白表达;采用免疫荧光法(immunofluorescence,IF)观察肺组织多糖包被syn-decan-1的水平。结果:光镜下显示,对照组和普通肝素组肺泡结构完整,几乎没有中性粒细胞浸润;而组蛋白组表现为肺泡结构不清,肺组织充血水肿,炎症细胞浸润明显,肺组织病理学评分显著高于对照组(0.77±0.04 vs 0.13±0.07,P0.01);与组蛋白组相比,组蛋白+普通肝素组肺损伤和炎症细胞浸润明显减少,肺组织病理学评分显著降低(0.49±0.11 vs 0.77±0.04,P0.01)。RT-qPCR显示,组蛋白组肺组织TF mRNA表达量约为对照组的8.67倍(P0.01);组蛋白+普通肝素组中TF的mRNA表达量约为对照组的3.86倍(P0.01),但较组蛋白组显著降低(P0.01)。组蛋白组肺组织FIB mRNA的表达量约为对照组的23.69倍(P0.01);组蛋白+普通肝素组FIB mRNA的表达量约为对照组的9.72倍(P0.01),但较组蛋白组显著降低(P0.01)。组蛋白组肺组织syndecan-1 mRNA表达量约为对照组的0.41倍(P0.01);组蛋白+普通肝素组syndecan-1 mRNA表达量约为对照组的0.74倍(P0.01),但较组蛋白组显著升高(P0.01)。Western blot显示,组蛋白组syndecan-1的蛋白在肺组织中水平显著低于对照组(0.12±0.01 vs 0.96±0.17,P0.05);而在组蛋白+普通肝素组syndecan-1的蛋白在肺组织中水平较组蛋白组显著增高(0.71±0.04 vs 0.12±0.01,P0.01)。IF显示,组蛋白组syndecan-1的蛋白在肺组织中表达显著低于对照组(P0.05);而在组蛋白+普通肝素组syndecan-1的表达水平较组蛋白组显著增高(P0.01)。结论:组蛋白可导致小鼠肺损伤、肺组织多糖包被破坏及凝血活化;普通肝素能有效减轻组蛋白诱导的小鼠肺损伤、肺组织多糖包被破坏和凝血活化。