B7-H3分子对肾透明细胞癌细胞系786-O转移作用机制的研究

作     者：谢金晶 张东泽 孙美云 张帅 张光波 Xie Jinjing;Zhang Dongze;Sun Meiyun;Zhang Shuai;Zhang Guangbo

作者机构：苏州大学医学部215000 苏州大学附属第一医院江苏省临床免疫学重点实验室215000 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2021年第41卷第10期

页      面：791-797页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81872328)。 

主　　题：B7-H3 肾透明细胞癌 786-O细胞 CCL4 

摘      要：目的探讨B7-H3分子对肾透明细胞癌细胞系786-O转移的影响。方法慢病毒感染法构建B7-H3低表达稳转细胞系(shB7-H3)和阴性对照组(shNC)。RT-qPCR、流式细胞术及Western blot试验验证慢病毒转染效率;CCK-8法检测shNC组和shB7-H3组786-O细胞增殖差异;流式细胞术检测两组细胞周期变化;细胞划痕和Transwell试验测定两组细胞迁移和侵袭能力差异;Western blot试验检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志蛋白表达变化;流式细胞术和RT-qPCR检测两组细胞趋化因子及其受体表达变化;Transwell试验检测抗CCL4阻断性抗体对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果流式细胞术检测发现人肾透明细胞癌细胞系786-O高表达B7-H3分子,慢病毒转染法成功构建B7-H3低表达细胞株(786-O-shB7-H3)和对照组细胞株(786-O-shNC)。B7-H3分子对786-O细胞增殖活性没有明显影响,shB7-H3和shNC两组细胞周期差异无统计学意义。与shNC组比较,shB7-H3组细胞迁移和侵袭能力降低,EMT相关标志蛋白(纤维连接蛋白和N-cadherin)表达水平降低,E-cadherin表达水平升高。shB7-H3组细胞中趋化因子CCL4及其受体CCR5表达低于shNC组,加入抗CCL4抗体阻断剂后shNC组细胞迁移和侵袭能力降低,而shB7-H3组无明显变化。结论敲低B7-H3分子表达对786-O细胞的增殖水平无明显影响,但可以影响786-O细胞的EMT进程,降低肿瘤迁移和侵袭能力,从而抑制肿瘤进展。