葡萄糖调节蛋白78对宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响

作     者：王妙 任云青 WANG Miao;REN Yun-Qing

作者机构：山西医科大学汾阳学院汾阳032200 山西医科大学研究生院太原030001 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2021年第37卷第19期

页      面：2376-2380页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：山西医科大学汾阳学院科研项目基金(No.2019C08)资助 

主　　题：葡萄糖调节蛋白78 SiHa细胞 侵袭 迁移 上皮间质转化 

摘      要：目的:探究GRP78对宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响以及作用机制。方法:采用RNAi技术沉默SiHa细胞中GRP78基因的表达。将针对不同位点设计的siRNA通过脂质体介导分别转染入SiHa细胞,通过免疫印迹法和qRT-PCR分别检测转染前后SiHa细胞GRP78蛋白和GRP78 mRNA的表达。划痕实验检测SiHa细胞的迁移能力;Transwell实验检测SiHa细胞的侵袭能力;免疫印迹法检测上皮间质转化相关蛋白及增殖相关蛋白的表达;流式细胞术检测SiHa细胞的凋亡率。结果:转染后,GRP78 mRNA和GRP78蛋白表达水平均明显降低且GRP78-siRNA1501的沉默效果最显著,基因水平和蛋白水平的检测总体趋势相符合;此外,与空白组和NC-siRNA组相比,GRP78-siRNA1501组SiHa细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显增高,N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显降低,且增殖相关蛋白P-AKT^(ser473)、P-GSK3β^(ser9)、Cyclin D1、CDK4表达水平也明显降低;Annexin V-FITC/PI双染结果显示,GRP78-siRNA1501组SiHa细胞的凋亡率明显高于NC-siRNA组。结论:沉默SiHa细胞中GRP78基因,会导致SiHa细胞增殖、侵袭和迁移能力减弱,并促进其凋亡。增殖能力减弱可能与抑制AKT/GSK3β/Cy-clin D1信号通路有关,侵袭和迁移能力减弱可能与抑制上皮间质转化的进程有关。